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J-GLOBAL ID:201802289167273778   整理番号:18A1574024

緑膿菌SY286株のセルラーゼ遺伝子のクローニングと発現【JST・京大機械翻訳】

Cloning and Expression of a Cellulase Gene from Ochrobactrum sp. SY286
著者 (6件):
資料名:
巻: 49  号:ページ: 279-285  発行年: 2018年 
JST資料番号: C2349A  ISSN: 1000-1700  CODEN: SNDBE7  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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卵菌による植物病害は制御しにくいことが多く、しばしば再感染回数が多く、爆発的流行により深刻な損失を招く。卵菌細胞壁の主要成分はセルロースであり、そのため、セルラーゼ産生能力を有する生防菌は、卵菌門真菌による植物病害の防除にもっと良い応用がある。SY286菌株は,Botrytiscinereaに対して強い阻害活性を示した。セルラーゼ活性試験の結果,SY286株の代謝産物はセルラーゼを含み,コロニー周辺の透明帯の幅は5.9mmであった。既報のセルラーゼ遺伝子の配列に従ってプライマーをデザインし、ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)により561bpのセルラーゼ遺伝子の関連断片が得られ、Blast比較により、この内切断β-1,4-グルカナーゼ遺伝子の配列との類似性は99%に達した。SY286遺伝子のコア配列である。この断片の配列に従って、特異的プライマーを設計し、インタリーブ型熱非対称PCR(Tail-PCR)により、その上流配列を得て、完全なセルラーゼ遺伝子のオープンリーディングフレーム(ORF)配列(SY286遺伝子と命名した)を得た。ORFの長さは1494bpで,蛋白質分子量は55.04kDaで,理論的等電点PIは8.12であった。Blast比較により、この配列とエンドカットβ-1,4-グルカナーゼのコード配列の類似性は99%に達し、SY286遺伝子がエンドカットβ-1,4-グルカナーゼ遺伝子であることが確認された。E.coliBL21(DE3)におけるこの蛋白質発現をSDS-PAGEによって分析した。0.5mmol?L-1のIPTG誘導下で、組換え菌は15°C、22°C、30°Cと37°Cの条件下で発現産物はPAGEゲルに特異的なバンドが現れた。組換え細菌はセルラーゼ活性を持っていた。試験の結果は,植物病害の生物的防除におけるセルラーゼの応用,およびSY286の抗菌分子メカニズムの研究と遺伝的改良の基礎を築いた。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】
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, 【Automatic Indexing@JST】
著者キーワード (4件):
分類 (2件):
分類
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微生物酵素の生産  ,  菌類による植物病害 
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