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J-GLOBAL ID：201902210249433002   整理番号：19A0436055

Parameciumアルギニンキナーゼの基質阻害の速度論的解析【JST・京大機械翻訳】

Kinetic Analyses of the Substrate Inhibition of Paramecium Arginine Kinase

著者 (2件)： Yano Daichi (Laboratory of Biochemistry, Faculty of Science and Technology, Kochi University, Kochi, Japan) ,  Suzuki Tomohiko (Laboratory of Biochemistry, Faculty of Science and Technology, Kochi University, Kochi, Japan)
資料名： Protein Journal  (Protein Journal)
巻： 37  号： 6  ページ： 581-588  発行年： 2018年 
JST資料番号： A1024A  ISSN： 1572-3887  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： ドイツ (DEU)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： Paramecium tetraureliaは4種類のアルギニンキナーゼ(AK1-AK4)を発現する。以前の研究において,AK3は典型的アルギニン基質阻害により特性化され,酵素活性はアルギニン基質の1mM濃度付近で顕著に減少することを示した。これは,Michaelis-Menten反応曲線に従う3つの他のAK型とは対照的である。もう一つの繊毛虫Tetrahymenaにおける細胞アルギニン濃度はin vivoで3~15mMと推定されるので,Paramecium AK3は基質阻害により強く影響される条件で機能する可能性がある。本研究の目的は,Paramecium AK3酵素の基質阻害の速度論的機構に関するいくつかの新しい側面を見出すことである。AK3に対する基質阻害動力学を3つのモデルを用いて解析し,それらの妥当性を3つの静的パラメータ(R2,AICc及びSy.x)で評価した。最も正確なモデルは,ESだけでなく,SES錯体も生成物を形成するために反応し,後者は活性中心に2つの基質を有する錯体であることを示した。SES複合体の最大反応速度,V_max~SES=30.4μmol Pi/分/mg蛋白質は,ES複合体の1/8,V_max~ES=241.7であった。SES複合体に対する解離定数(K_i~SES:0.34mM)はES複合体(K_s~ES:0.61mM)のそれより2倍小さく,アルギニン基質(ES複合体形成)の一次結合後,二次誘導阻害部位への第二アルギニンの結合が加速され,V_max~SESが低いSES複合体を形成することを示唆した。同じ速度論をS79A,S80A,V81A変異体に用いた。結果は,S79残基が第二アルギニン基質の結合過程に有意に関与することを示した。ここでは,K_i~SES値は野生型(0.34mM)の10倍(3.62mM)であり,基質阻害を弱めた。対照的に,突然変異体のV_max~ESとV_max~SES値はS79A変異体のV_max~SESを除いて1/3減少し,野生型の値と同程度であった。Copyright 2018 Springer Science+Business Media, LLC, part of Springer Nature Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 反応速度 ,  キャラクタリゼーション ,  酵素 ,  タンパク質 ,  複合体 ,  酵素活性度 ,  錯体 ,  解離定数 ,  野生型 ,  酵素反応速度論 ,  *基質 ,  *ゾウリムシ属 ,  モデリング ,  *速度論 ,  *アルギニンキナーゼ ,  *微生物 ,  *原生動物 ,  *繊毛虫門 ,  アミノ酸 ,  脂肪族アミン ,  脂肪族カルボン酸 ,  第一アミン

著者キーワード (4件)： アルギニンキナーゼ ,  酵素動力学 ,  基質阻害 ,  Paramecium tetraurelia

分類 (2件)： 酵素一般  (EB09010D) ,  酵素生理  (EJ02020P)

物質索引 (1件)： アルギニン

タイトルに関連する用語 (5件)： Paramecium ,  アルギニンキナーゼ ,  基質阻害 ,  速度論 ,  解析