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J-GLOBAL ID:201902226335153804   整理番号:19A2857180

超分子蛋白質複合体のための同位体支援NMR法における最近の開発 セイル芳香族トロイ【JST・京大機械翻訳】

Recent developments in isotope-aided NMR methods for supramolecular protein complexes -SAIL aromatic TROSY
著者 (6件):
資料名:
巻: 1864  号:ページ: Null  発行年: 2020年 
JST資料番号: B0207A  ISSN: 0005-2728  CODEN: BBBMBS  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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原子レベルでの大きな蛋白質複合体に対する構造-機能関係は,これまでに研究されていない芳香環NMRシグナルが現在使用されている骨格アミドおよび側鎖メチルシグナルに加えてアクセス可能になったならば,包括的に理解されるであろう。Trp及びPheを有する緩和最適化同位体標識環で選択的に標識した82kDaリンゴ酸シンターゼG(MSG)蛋白質を調製し,芳香族TROSYスペクトルを得るための最適条件を調べた。[δ_1,ε_3,η_2]-SAIL Trpまたはζ-SAIL Pheのどちらかで選択的に標識したMSG蛋白質は,MSG中の12Trpおよび19Phe残基に対して良く分離された狭いTROSYシグナルを提供した。シグナルは単一アミノ酸置換突然変異体のセットを用いて配列特異的に割り当てられた。TyrまたはLeuによる各Pheの部位特異的置換は,他の芳香環シグナルに対する実質的な化学シフトを誘導し,以前に提案された構造ドメインに匹敵するMSGにおける芳香族クラスターを同定することを可能にした。直接結合した13C及び隣接1Hスピンを持たない芳香環13CH対は,環が完全に重水素化されたアミノ酸により囲まれると驚くほど狭いTROSYシグナルを与えることを示した。観測されたシグナルは,メチルの帰属が利用可能であれば,芳香族とメチルプロトンの間の単一アミノ酸置換またはNOEのどちらかによって容易に帰属できる。ここで述べた方法は,脂質二分子層中の蛋白質またはおそらく生細胞のような困難な標的に対して一般的に適用可能であり,したがって,構造生物学におけるこれらの新しいプローブを用いる前例のない機会を提供する。Copyright 2019 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
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JSTが定めた文献の分類名称とコードです
分子構造  ,  蛋白質・ペプチド一般 

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