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J-GLOBAL ID：201902228196286157   整理番号：19A1528031

ウシ白血病ウイルスの長末端反復U3領域におけるグルココルチコイド応答要素の変異を含むレポータープラスミドに基づく高感度発光シンシチウム誘導アッセイ(LUSIA)【JST・京大機械翻訳】

A sensitive luminescence syncytium induction assay (LuSIA) based on a reporter plasmid containing a mutation in the glucocorticoid response element in the long terminal repeat U3 region of bovine leukemia virus

著者 (15件)： Sato Hirotaka (Nano Medical Engineering Laboratory, RIKEN Cluster for Pioneering Research, Saitama, Japan) ,  Sato Hirotaka (Virus Infectious Diseases Unit, RIKEN, Saitama, Japan) ,  Watanuki Sonoko (Nano Medical Engineering Laboratory, RIKEN Cluster for Pioneering Research, Saitama, Japan) ,  Watanuki Sonoko (Virus Infectious Diseases Unit, RIKEN, Saitama, Japan) ,  Watanuki Sonoko (Laboratory of Global Animal Resource Science, Graduate School of Agricultural and Life Sciences, The University of Tokyo, Tokyo, Japan) ,  Bai Lanlan (Nano Medical Engineering Laboratory, RIKEN Cluster for Pioneering Research, Saitama, Japan) ,  Bai Lanlan (Virus Infectious Diseases Unit, RIKEN, Saitama, Japan) ,  Borjigin Liushiqi (Nano Medical Engineering Laboratory, RIKEN Cluster for Pioneering Research, Saitama, Japan) ,  Ishizaki Hiroshi (Grazing Animal Unit, Division of Grassland Farming, Institute of Livestock and Grassland Science, Nasushiobara, Japan) ,  Matsumoto Yasunobu (Laboratory of Global Animal Resource Science, Graduate School of Agricultural and Life Sciences, The University of Tokyo, Tokyo, Japan) ,  Hachiya Yuma (Department of Veterinary Medicine, Nihon University, Fujisawa, Japan) ,  Sentsui Hiroshi (Department of Veterinary Medicine, Nihon University, Fujisawa, Japan) ,  Aida Yoko (Nano Medical Engineering Laboratory, RIKEN Cluster for Pioneering Research, Saitama, Japan) ,  Aida Yoko (Virus Infectious Diseases Unit, RIKEN, Saitama, Japan) ,  Aida Yoko (Laboratory of Global Animal Resource Science, Graduate School of Agricultural and Life Sciences, The University of Tokyo, Tokyo, Japan)
資料名： Virology Journal (Web)  (Virology Journal (Web))
巻： 16  号： 1  ページ： 66  発行年： 2019年 
JST資料番号： U7347A  ISSN： 1743-422X  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： イギリス (GBR)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： ウシ白血病ウイルス(BLV)は,ウシの最も一般的な新生物疾患であるenzoticウシ白血病を引き起こす。以前に,著者らは,BLV感染細胞と共培養した時に,緑色蛍光蛋白質(EGFP)を発現するシンシチウムを形成するCC81-BLU3G細胞に基づくBLV感染性のアッセイである発光シンシチウム誘導アッセイ(LuSIA)を報告した。より敏感なLuSIAを開発するために,ここでは,BLV長末端反復(LTR)のU3領域内のグルココルチコイド応答要素(GRE)に焦点を当てた。部位特異的変異誘発によりBLV-LTR U3領域プロモーターを含むpBLU3-EGFPレポータープラスミドにおいてGREの5ヌクレオチド部位を変化させ,EGFPレポーター遺伝子をGRE変異LTR-U3プロモーターの制御下で発現させた新しいレポータープラスミド(pBLU3GREM-EGFP)を構築した。また,GRE変異LTR-U3プロモーター(CC81-GREMG)を有する新しいCC81由来レポーター細胞系を確立した。CC81-GREMGを用いたLuSIAの感受性,有用性および特異性を評価するために,BLV感染ウシ由来のCC81-GREMG細胞,およびウシ免疫不全様ウイルス(BIV)感染細胞とウシ免疫不全ウイルス(BIV)感染細胞を共培養した。GREに変異を持つ新しいレポータープラスミドを構築し,新しいレポーター細胞系CC81-GREMGを確立した。この系統は,EGFP遺伝子がGRE変異LTR-U3プロモーターの制御下で発現され,BLV感染性の直接可視化を可能にするpBLU3GREM-EGFPにより安定的にトランスフェクションされた。CC81-GREMG細胞を用いた新しいLuSIAプロトコルは,CC81-BLU3Gを用いた以前のプロトコルよりも,BLVの細胞から細胞への感染性と無細胞感染性をより敏感に測定する。さらに,それはBIVとBFV感染に反応せず,CC81-GREMGに基づくLuSIAがBLV感染性に特異的であることを示した。さらに,BLV感染ウシ由来の白血球(WBCs)を用いたCC81-GREMG細胞に基づく新しいLuSIAの有用性を確認した。最後に,本アッセイは,BLV感染ウシから採取した血漿中の中和抗体の活性を評価するのに有用であった。新しいLuSIAプロトコルは,CC81-BLU3G細胞に基づく以前の分析よりも定量的で感度が高く,いくつかの新しいBLVアッセイの開発を容易にするはずである。Copyright 2019 The Author(s) All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *グルココルチコイド ,  プロモーター領域 ,  *変異 ,  *発光 ,  *LTR【ウイルス】 ,  トランスフェクション ,  血漿 ,  ヌクレオチド ,  可視化 ,  免疫不全症候群 ,  共培養 ,  *プラスミド
準シソーラス用語： 特異性 ,  EGFP ,  *シンシチウム , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (7件)： ウシ白血病ウイルス ,  感染性 ,  可視化 ,  LUSIA(発光シンシチウム誘導アッセイ) ,  長末端反復U3領域 ,  Tax依存性レポーター ,  グルココルチコイド応答要素

分類 (2件)： ウイルスによる動物の伝染病  (FE02024R) ,  ウイルス感染の生理と病原性  (EG04042Y)

引用文献 (25件)：

• Front Microbiol; Mechanisms of pathogenesis induced by bovine leukemia virus as a model for human T-cell leukemia virus; Y Aida, H Murakami, M Takahashi, SN Takeshima; 4; 2013; 328; 10.3389/fmicb.2013.00328; citation_id=CR1
• J Dairy Sci; Association between bovine leukemia virus, production, and population age in Michigan dairy herds; RJ Erskine, PC Bartlett, TM Byrem, CL Render, C Febvay, JT Houseman; 95; 2012; 727-734; 10.3168/jds.2011-4760; citation_id=CR2
• Am J Vet Res; Use of a feline cell line in the syncytia infectivity assay for the detection of bovine leukemia virus infection in cattle; JF Ferrer, C Cabradilla, P Gupta; 42; 1981; 9-14; citation_id=CR3
• Cancer Res; In vitro transmission and propagation of the bovine leukemia virus in monolayer cell cultures; DC Graves, JF Ferrer; 36; 1976; 4152-4159; citation_id=CR4
• Arch Virol; Development of a luminescence syncytium induction assay (LuSIA) for easily detecting and quantitatively measuring bovine leukemia virus infection; H Sato, S Watanuki, H Murakami, R Sato, H Ishizaki, Y Aida; 163; 6; 2018; 1519-1530; 10.1007/s00705-018-3744-7; citation_id=CR5

タイトルに関連する用語 (10件)： ウシ白血病ウイルス ,  長末端反復 ,  グルココルチコイド ,  応答要素 ,  変異 ,  プラスミド ,  高感度 ,  シンシチウム ,  誘導 ,  アッセイ