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J-GLOBAL ID:201902267772581598   整理番号:19A0780728

ミニオンナノポア配列を持つPlasmodium falciparumのKelch13におけるコドン突然変異C580Yの革新的診断技術【JST・京大機械翻訳】

An innovative diagnostic technology for the codon mutation C580Y in kelch13 of Plasmodium falciparum with MinION nanopore sequencer
著者 (24件):
資料名:
巻: 17  号:ページ: 217  発行年: 2018年 
JST資料番号: U7332A  ISSN: 1475-2875  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: イギリス (GBR)  言語: 英語 (EN)
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アルテミシニン(ART)耐性Plasmodium falciparumの最近の普及は,公衆衛生に対する新興の世界的脅威を表している。東南アジアにおいて,kelch13(k13)のC580Y突然変異は,ART耐性P.falciparumの優性突然変異である。したがって,C580Y突然変異の検出のための簡単な方法は,現場での広範なルーチン監視を可能にするために緊急に必要である。本研究の目的は,ミニイオンナノ細孔sequサーと組み合わせたループ媒介等温増幅(LAMP)を用いたC580Y突然変異に対する新しい診断手順を開発することである。C580Y突然変異を検出するためのP.falciparumのk13遺伝子に対するLAMPアッセイを成功裏に開発した。この手順の検出限界は,60分以内にk13遺伝子を持つ参照プラスミドの10コピーであった。その後,ミニイオンナノ細孔sequサーを用いたLAMP産物のアンプリコン配列決定を行い,遺伝子のヌクレオチド配列を明らかにした。C580Y突然変異は,配列決定の開始の30分後にミニイオンから集められた配列データに基づいて同定された。さらに,インドネシアのP.falciparumマラリア患者から採取した34人のヒト血液試料におけるLAMPアッセイの臨床評価は,100%の陽性検出率を明らかにした。12試料までのすべてのLAMPアンプリコンを,ミニイオンを用いて同時に配列決定した。配列決定の結果は,従来のPCRとSanger配列決定プロトコルのものと一致した。DNA抽出から変異体calへのすべての手順を3時間以内に完了した。C580Y突然変異はインドネシアにおけるこれら34のP.falciparum分離株の間で見つからなかった。LAMPとミニオンを組み合わせた革新的な方法は,発展途上国における資源制限状況においてさえ,P.falciparumのC580Y突然変異の簡単で迅速で高感度な検出を可能にするであろう。Copyright 2019 The Author(s) All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
分類
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感染症・寄生虫症一般  ,  遺伝的変異 
引用文献 (55件):
  • WHO. Global Malaria Programme Artemisinin and artemisinin-based combination therapy resistance. Status report. Geneva: World Health Organization; 2016.
  • N Engl J Med; Artemisinin resistance in Plasmodium falciparum malaria; AM Dondorp, F Nosten, P Yi, D Das, AP Phyo, J Tarning; 361; 2009; 455-467; 10.1056/NEJMoa0808859; citation_id=CR2
  • N Engl J Med; Spread of artemisinin resistance in malaria; M Hawkes, AL Conroy, KC Kain; 371; 2014; 1944-1945; 10.1056/NEJMc1410735; citation_id=CR3
  • N Engl J Med; Evidence of artemisinin-resistant malaria in western Cambodia; H Noedl, Y Se, K Schaecher, BL Smith, D Socheat, MM Fukuda; 359; 2008; 2619-2620; 10.1056/NEJMc0805011; citation_id=CR4
  • Guidelines for the treatment of malaria; 2015; CR5; citation_publisher=World Health Organization
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