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J-GLOBAL ID：201902268821368742   整理番号：19A1804791

非標識基質とDNAザイム支援カスケード増幅に基づくリボヌクレアーゼHの蛍光アッセイ【JST・京大機械翻訳】

Fluorescence Assay for Ribonuclease H Based on Nonlabeled Substrate and DNAzyme Assisted Cascade Amplification

著者 (7件)： Wang Lanbo (College of Biology, Hunan Province Key Laboratory of Plant Functional Genomics and Developmental Regulation, State Key Laboratory of Chem/Biosensing and Chemometrics, Hunan University, Hunan, China) ,  Zhou Hongyan (College of Biology, Hunan Province Key Laboratory of Plant Functional Genomics and Developmental Regulation, State Key Laboratory of Chem/Biosensing and Chemometrics, Hunan University, Hunan, China) ,  Liu Bin (College of Biology, Hunan Province Key Laboratory of Plant Functional Genomics and Developmental Regulation, State Key Laboratory of Chem/Biosensing and Chemometrics, Hunan University, Hunan, China) ,  Zhao Chuan (College of Biology, Hunan Province Key Laboratory of Plant Functional Genomics and Developmental Regulation, State Key Laboratory of Chem/Biosensing and Chemometrics, Hunan University, Hunan, China) ,  Fan Jialong (College of Biology, Hunan Province Key Laboratory of Plant Functional Genomics and Developmental Regulation, State Key Laboratory of Chem/Biosensing and Chemometrics, Hunan University, Hunan, China) ,  Wang Wei (TCM and Ethnomedicine Innovation and Development Laboratory, Sino-Luxemburg TCM Research Center, School of Pharmacy, Hunan University of Chinese Medicine, Hunan, China) ,  Tong Chunyi (College of Biology, Hunan Province Key Laboratory of Plant Functional Genomics and Developmental Regulation, State Key Laboratory of Chem/Biosensing and Chemometrics, Hunan University, Hunan, China)
資料名： Analytical Chemistry  (Analytical Chemistry)
巻： 89  号： 20  ページ： 11014-11020  発行年： 2017年 
JST資料番号： A0395A  ISSN： 0003-2700  CODEN： ANCHAM  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 高度に保存された損傷修復蛋白質として,RNアーゼHはDNA-RNAキメラ鎖のRNAを特異的に加水分解できる。結合および触媒部位から成る合成一本鎖DNAであるDNAザイムは,補因子の存在下でRNAを切断することができる。本研究では,DNAザイムの切断特性を支援する高感度RNアーゼHアッセイを確立した。DNAザイム配列を含むDNA-RNAキメラ鎖をRNアーゼHの加水分解基質として用いた。キメラ基質のRNアーゼH加水分解はDNAザイムの放出をもたらす。分子ビーコンであるサブセグメントDNAザイム消化物は,ヘアピン構造を破壊することにより「ターンオン」蛍光シグナルを引き起こす。さらに,蛍光シグナルはDNAザイムの分子ビーコン基質へのサイクリック分解により増幅される。最適条件下で,RNアーゼHの検出限界は0.01U/mLであり,それはいくつかの代替法のものより優れている。さらに,本酵素に対する天然化合物の影響を調べるとともに,不均一生物学的試料におけるRNアーゼH検出に本法を用いた。まとめると,これらの結果は,この方法がRNアーゼH活性を監視するための普遍的なプラットフォームを提供するだけでなく,生物医学研究および薬物スクリーニングにおいて大きな可能性を示すことを示している。Copyright 2019 American Chemical Society All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： ターンオン ,  活性部位 ,  キメラ ,  タンパク質 ,  *基質 ,  ヘアピン構造 ,  補因子 ,  *蛍光 ,  加水分解 ,  RNA【核酸】 ,  最適条件 ,  検出限界 ,  *DNA【核酸】
準シソーラス用語： 分子ビーコン ,  *触媒活性DNA , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (1件)： 核酸一般  (EB04010U)

タイトルに関連する用語 (9件)： 標識 ,  基質 ,  DNAザイム ,  支援 ,  カスケード ,  増幅 ,  リボヌクレアーゼH ,  蛍光 ,  アッセイ