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J-GLOBAL ID：202002221186533287   整理番号：20A2010807

酸性条件下で改良された活性のためのGeobacillus stearothermophilus由来L-アラビノースイソメラーゼの発現と特性化【JST・京大機械翻訳】

Expression and characterization of l-arabinose isomerase from Geobacillus stearothermophilus for improved activity under acidic condition

著者 (8件)： Laksmi Fina Amreta (The United Graduate School of Agricultural Sciences, Kagoshima University, 1-21-24, Korimoto, Kagoshima, 890-0065, Japan) ,  Arai Shigeki (Institute for Quantum Life Science, National Institute for Quantum and Radiological Science and Technology, 2-4 Shirakata, Tokai, Ibaraki, 319-1106, Japan) ,  Arakawa Tsutomu (Alliance Protein Laboratories, a Division of KBI Biopharma, 6042 Cornerstone Court West, Suite A, San Diego, CA, 92121, USA) ,  Tsurumaru Hirohito (The United Graduate School of Agricultural Sciences, Kagoshima University, 1-21-24, Korimoto, Kagoshima, 890-0065, Japan) ,  Nakamura Yoshitaka (The United Graduate School of Agricultural Sciences, Kagoshima University, 1-21-24, Korimoto, Kagoshima, 890-0065, Japan) ,  Saksono Budi (Research Center for Biotechnology, Indonesian Institute of Sciences (LIPI), Jalan Raya Bogor Km. 46, Cibinong, 16911, Indonesia) ,  Tokunaga Masao (The United Graduate School of Agricultural Sciences, Kagoshima University, 1-21-24, Korimoto, Kagoshima, 890-0065, Japan) ,  Ishibashi Matsujiro (The United Graduate School of Agricultural Sciences, Kagoshima University, 1-21-24, Korimoto, Kagoshima, 890-0065, Japan)
資料名： Protein Expression and Purification  (Protein Expression and Purification)
巻： 175  ページ： Null  発行年： 2020年 
JST資料番号： W0282A  ISSN： 1046-5928  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 低カロリー糖置換甘味料,D-タガトースは基質D-ガラクトースからL-アラビノースイソメラーゼ(L-AI)により生産できる。しかし,このプロセスはアルカリ性pHと高温で行った場合,Maillard反応を受ける。したがって,工業的応用では,Maillard反応を最小化するために,わずかに酸性条件下での反応が望ましい。以前に,著者らは,より大きな基質特異性を有するGeobacillus stearothermophilusからL-AI,H18Tの突然変異体を得た。H18Tは優れた熱安定性を有したが,酸性条件下でのその活性は最適ではなかった。ここでは,H18T蛋白質,H18T-Y234Cの可能性のある変異体を得て,H18Tの結合ポケット領域周辺のエラー傾向PCRを用いたランダム変異誘発に基づいて,pH6.0で改善された活性を達成した。この二重H18T-Y234C変異体は,親H18Tおよび野生型よりpH6.0で1.8倍および3倍高い活性を有し,それによって最適pH範囲は6.0~8.0に広がった。残基234におけるTyrからCysへの変異はL-AIの二次構造にほとんど影響しなかった。さらに,ジスルフィド結合の形成は検出されなかった。したがって,pH6.0での活性の改善は,おそらく残基234を含む結合ポケット領域の変化に起因する。本研究は酸性条件下での活性の改善における残基234の重要性に関する洞察を提供する。Copyright 2020 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 高温 ,  Maillard反応 ,  甘味料 ,  基質 ,  基質特異性 ,  ジスルフィド結合 ,  タンパク質 ,  結合部位 ,  二次構造 ,  *酸性 ,  野生型
準シソーラス用語： *Geobacillus stearothermophilus ,  *L-アラビノースイソメラーゼ ,  残基 ,  最適pH , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： L-アラビノースイソメラーゼ ,  d-タガトース ,  酸性適応 ,  エラー傾向PCR ,  pHプロファイル

分類 (2件)： 酵素一般  (EB09010D) ,  遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (6件)： 酸性条件 ,  活性 ,  Geobacillus ,  L-アラビノースイソメラーゼ ,  発現 ,  特性化