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J-GLOBAL ID：202002224552330068   整理番号：20A1977510

CRISPR/Cas9技術に基づくTRPV1遺伝子ノックアウトのCACO-2安定細胞株を構築した。【JST・京大機械翻訳】

Construction of TRPV1 gene knockout Caco-2 stable cell line based on CRISPR/Cas9 technology

著者 (2件)： Wang Yuanwei (西南民族大学生命科学与技術学院,四川成都,610041) ,  Liu Xiong (西南大学食品科学学院,重慶,400715)
資料名： Xinan Minzu Daxue Xuebao (Zirankexueban)  (Xinan Minzu Daxue Xuebao (Zirankexueban))
巻： 46  号： 3  ページ： 241-249  発行年： 2020年 
JST資料番号： C4205A  ISSN： 2095-4271  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： CRISPR/Cas9遺伝子編集技術に基づき、ヒト結腸直腸腺癌細胞Caco-2におけるカプサイシン受容体遺伝子TRPV1をノックアウトし、TRPV1遺伝子ノックアウトのCaco-2安定細胞株を構築した。CRISPR/Cas9オンライン標的設計プログラムを用いて、TRPV1遺伝子の4つの転写物の共通CDS領域の第一エクソンDNA領域に一対のgRNAを設計し、gRNAを真核組換えプラスミドのベクターに構築し、ノックアウト細胞を電気トランスフェクションした。プリン毒素抵抗性スクリーニングと遺伝子シークエンシングにより、TRPV1遺伝子をノックアウトする安定細胞株を獲得した。TRPV1遺伝子の蛋白質発現を,ウエスタンブロットによって確認し,TRPV1遺伝子のノックアウト効果を,CCK-8によって検出し,そして,TRPV1ノックアウト細胞の成長曲線を,CCK-8によって検出した。細胞成長に及ぼすTRPV1遺伝子ノックアウトの影響を,野生型細胞と比較した。TRPV1遺伝子ノックアウトのCACO-2安定細胞株を選別し、そしてTRPV1ノックアウトはCaco-2細胞の成長に対して著しい影響がなかった。CRISPR/Cas9遺伝子編集技術に基づき、TRPV1遺伝子ノックアウトのCACO-2安定細胞株の構築に成功し、その後のカプサイシンによる腸管脂質吸収への影響のメカニズム研究に有利なツールを提供した。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： DNA【核酸】 ,  *遺伝子 ,  毒素 ,  ヒト ,  細胞増殖 ,  スクリーニング ,  トランスフェクション ,  野生型 ,  ベクター ,  ウェスタンブロット法 ,  Caco2細胞 ,  不飽和脂肪酸 ,  フェノール類 ,  オレフィン化合物 ,  カルボアミド ,  フェノールエーテル
準シソーラス用語： *細胞株 ,  蛋白質発現 ,  *Cas9 , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (1件)： 遺伝子操作  (EC02050B)

物質索引 (1件)： カプサイシン

タイトルに関連する用語 (6件)： CRISPR ,  Cas9 ,  TRPV1 ,  遺伝子ノックアウト ,  細胞株 ,  構築