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J-GLOBAL ID:202002234419334171   整理番号:20A1892828

グルタミン酸輸送体ホモログにおけるドメイン運動を監視するための常磁性19F NMRの利用【JST・京大機械翻訳】

Use of paramagnetic 19F NMR to monitor domain movement in a glutamate transporter homolog
著者 (12件):
資料名:
巻: 16  号:ページ: 1006-1012  発行年: 2020年 
JST資料番号: W2213A  ISSN: 1552-4450  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: ドイツ (DEU)  言語: 英語 (EN)
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配座転移が機能的に重要である蛋白質では,アクセス可能な状態の数とそれらの動力学は,しばしば確立が困難である。ここでは,大きな膜蛋白質の動力学を調べる新しい19F-NMR分光法について述べた。システイン化学を介して19Fプローブでグルタミン酸輸送体相同体を標識し,ジヒスチジンモチーフによるキレート化を介してNi2+イオンで標識した。観測した共鳴を帰属するために常磁性金属による19F核の縦緩和の距離依存増強を用いた。基質結合部位がそれぞれ細胞外および細胞内溶液に近い輸送体の1つの内向きおよび2つの外向き表面状態を同定した。次に,クライオ-EMにより予想外の第2の外向き表面状態の構造を解明した。最後に,立体配座交換の速度は19F核の金属増強縦緩和の測定からアクセスできることを示した。グルタミン酸輸送体GltPhの立体配座動力学をモニターする19F-NMRに基づく方法は,凍結-EMにより特性化される1つの予想外の外向き表面状態を含む,1つの内向きおよび2つの外向き表面状態を同定した。Copyright The Author(s), under exclusive licence to Springer Nature America, Inc. 2020 Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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