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J-GLOBAL ID：202002235796431441   整理番号：20A0975077

Clostridium perfringensのAtoxic C末端CPA毒素を発現する組換えバキュロウイルスの生成と特異抗体の生産【JST・京大機械翻訳】

Generation of recombinant baculovirus expressing atoxic C-terminal CPA toxin of Clostridium perfringens and production of specific antibodies

著者 (9件)： Forti Katia (Istituto Zooprofilattico Sperimentale dell’Umbria e delle Marche “Togo Rosati”, Perugia, Italy) ,  Forti Katia (Dipartimento di Medicina Veterinaria, Universita degli Studi di Perugia, Perugia, Italy) ,  Cagiola Monica (Istituto Zooprofilattico Sperimentale dell’Umbria e delle Marche “Togo Rosati”, Perugia, Italy) ,  Pellegrini Martina (Istituto Zooprofilattico Sperimentale dell’Umbria e delle Marche “Togo Rosati”, Perugia, Italy) ,  Anzalone Lucia (Istituto Zooprofilattico Sperimentale dell’Umbria e delle Marche “Togo Rosati”, Perugia, Italy) ,  Paolo Antonella Di (Istituto Zooprofilattico Sperimentale dell’Umbria e delle Marche “Togo Rosati”, Perugia, Italy) ,  Corneli Sara (Istituto Zooprofilattico Sperimentale dell’Umbria e delle Marche “Togo Rosati”, Perugia, Italy) ,  Severi Giulio (Istituto Zooprofilattico Sperimentale dell’Umbria e delle Marche “Togo Rosati”, Perugia, Italy) ,  Giuseppe Antonio De (Istituto Zooprofilattico Sperimentale dell’Umbria e delle Marche “Togo Rosati”, Perugia, Italy)
資料名： BMC Biotechnology (Web)  (BMC Biotechnology (Web))
巻： 20  号： 1  ページ： 1-15  発行年： 2020年 
JST資料番号： U7348A  ISSN： 1472-6750  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： イギリス (GBR)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： Clostridium perfringensは,動物およびヒトにおけるいくつかの疾患および腸内感染の原因物質である。C.perfringensの病原性は多くの毒素の産生に起因する。これらのうち,アルファ毒素(CPA)は組織毒性感染(ガス壊そ)において重要な役割を果たす。CPA毒素は2つのドメイン,すなわちN末端ドメインアミノ酸(aa残基1~250)に存在するホスホリパーゼC活性部位,及びカルシウムイオン存在下での膜リン脂質と毒素の相互作用に関与するC末端領域(aa残基251~370)からなる。現在生産されているクロストリジウムワクチンは,ほとんどホルマリンを用いて不活性化された培養上清から誘導されるトキソイドを含む。CPAは免疫原性抗原である。最近,大腸菌で生産された毒素のC末端ドメインで免疫化されたマウスがC.perfringens感染に対して保護され,産生された抗血清がCPA活性を阻害できることが示されている。モノクローナル抗体およびポリクローナル抗体は完全長CPAに対してのみ産生され,短縮型に対しては産生されなかった。本研究では,初めて報告した。N末端ドメインを欠く欠失rCPA毒素(rBacCPA250-363H6)と推定シグナル配列の28アミノ酸(aa)を生産できる組換えバキュロウイルスの生成について述べた。翻訳開始コドンATGの上流のL21コンセンサス配列の挿入は,バキュロウイルスに基づく発現系における組換え蛋白質の収率を劇的に増加させる。蛋白質をNi-NTAアフィニティークロマトグラフィーにより精製し,in vitroでの毒性の欠如をCaCo-2細胞で確認した。ポリクローナル抗体と8つのハイブリッド分泌モノクローナル抗体を作成し,特異性と反応性を評価するために試験した。フラグメントrBacCPA250-363H6に対して得られた抗血清は完全長PLCのホスホリパーゼC活性を中和した。L21リーダー配列は,昆虫細胞で産生された有酸素C末端組換えCPA蛋白質の発現を増強した。得られたモノクローナル抗体とポリクローナル抗体は特異的で高反応性であった。これらの生物学の利用可能性は,診断アッセイおよび/または新しい組換え蛋白質ワクチンの開発に寄与する可能性がある。Copyright 2020 The Author(s) All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 大腸菌 ,  抗血清 ,  抗原 ,  *毒素 ,  ヒト ,  ワクチン ,  活性部位 ,  アフィニティークロマトグラフィー ,  病原性 ,  *Welch菌 ,  モノクローナル抗体 ,  *バキュロウイルス科 ,  in vitro実験 ,  組換タンパク質 ,  ポリクローナル抗体

著者キーワード (5件)： Clostridium perfringens ,  L21リーダー配列 ,  Atoxic RBACPA250-363H6 ,  アフィニティークロマトグラフィー ,  組換えワクチン

分類 (1件)： 免疫療法薬・血液製剤の基礎研究  (GW22010D)

引用文献 (48件)：

• Rood JI, Adams V, Lacey J, Lyras D, BA MC, Melville SB, et al. Expansion of the Clostridium perfringens toxin-based typing scheme. Anaerobe. 2018.
• Clostridial Toxins Involved in Human Enteric and Histotoxic Infections; Clostridia: Biotecnology and Medical Application; 2005; 169-209; CR2; BA McClane, citation_author=JI Rood
• Future Microbiol; Towards an understanding of the role of Clostridium perfringens toxins in human and animal disease; FA Uzal, JC Freedman, A Shrestha, JR Theoret, J Garcia, MM Awad; 9; 3; 2014; 361-377; 10.2217/fmb.13.168; citation_id=CR3
• Toxicon; Role of Clostridium perfringens phospholipase C in the pathogenesis of gas gangrene; Marietta Flores-Dı́az, Alberto Alape-Girón; 42; 8; 2003; 979-986; 10.1016/j.toxicon.2003.11.013; citation_id=CR4
• Infect Immun; Synergistic effects of alpha-toxin and Perfringolysin O in Clostridium perfringens-mediated gas gangrene; MM Awad, DM Ellemor, RL Boyd, JJ Emmins, JI Rood; 69; 12; 2001; 7904-7910; 10.1128/IAI.69.12.7904-7910.2001; citation_id=CR5

タイトルに関連する用語 (8件)： Clostridium ,  C末端 ,  CPA ,  毒素 ,  発現 ,  組換え ,  バキュロウイルス ,  特異抗体