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J-GLOBAL ID:202002250983316525   整理番号:20A2256363

バルク蛍光ストップトフローアッセイにおけるヘリカーゼ仲介鎖内G4変性の定量的及び実時間測定【JST・京大機械翻訳】

Quantitative and real-time measurement of helicase-mediated intra-stranded G4 unfolding in bulk fluorescence stopped-flow assays
著者 (10件):
資料名:
巻: 412  号: 27  ページ: 7395-7404  発行年: 2020年 
JST資料番号: E0425B  ISSN: 1618-2642  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: ドイツ (DEU)  言語: 英語 (EN)
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G-Quadruplex(G4s)は,染色体複製と遺伝子発現の強力な障害を提起し,細胞中のヘリカーゼによる分解能を必要とする,熱力学的に安定な,コンパクトで,あまり水和されていない構造である。バルクストップトフロー蛍光アッセイはヘリカーゼ媒介二本鎖DNA巻き戻しに多くの機構的洞察を与えた。しかし,今日まで,二本鎖DNAの研究に用いられるものと同等または同程度の分子内G-四重螺旋の詳細な研究は,まだ不足している。ここでは,リアルタイムでのヘリカーゼ媒介分子内G-四重螺旋アンフォールディングの直接および定量的測定の方法について述べた。一連の部位特異的蛍光標識分子内G4sを設計し,ヘリカーゼ媒介G4アンフォールディングを特性化するために適切な基質をスクリーニングした。開発した方法により,G4トラップの存在下,G4(≒5s-1)のアンフォールディングとリフォールディング定数,および単一ターンオーバー実験条件下での他の相対パラメータを初めて決定した。本アプローチは,ストップトフローアッセイを用いてヘリカーゼ媒介分子内G4アンフォールディングを特性化するための新しいパラダイムを提供するだけでなく,治療薬物標的としてG4アンフォールディングヘリカーゼの阻害剤をスクリーニングする方法を提供する。Copyright Springer-Verlag GmbH Germany, part of Springer Nature 2020 Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (3件):
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核酸一般  ,  バイオアッセイ  ,  遺伝学研究法 

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