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J-GLOBAL ID：202002262490265840   整理番号：20A1176016

Escherichia coliにおけるAspergillus niger AS3.4523由来の高活性β-グルコシダーゼの発現とGardenia Blue調製におけるその応用【JST・京大機械翻訳】

Expression of a highly active β-glucosidase from Aspergillus niger AS3.4523 in Escherichia coli and its application in gardenia blue preparation

著者 (8件)： Hao Shuai (Beijing Advanced Innovation Center for Food Nutrition and Human Health, Beijing Engineering and Technology Research Center of Food Additives, Beijing Technology and Business University, Beijing, China) ,  Liu Yuanpu (Beijing Advanced Innovation Center for Food Nutrition and Human Health, Beijing Engineering and Technology Research Center of Food Additives, Beijing Technology and Business University, Beijing, China) ,  Qin Yu (Beijing Advanced Innovation Center for Food Nutrition and Human Health, Beijing Engineering and Technology Research Center of Food Additives, Beijing Technology and Business University, Beijing, China) ,  Zhao Lei (Beijing Advanced Innovation Center for Food Nutrition and Human Health, Beijing Engineering and Technology Research Center of Food Additives, Beijing Technology and Business University, Beijing, China) ,  Zhang Jiawen (Beijing Advanced Innovation Center for Food Nutrition and Human Health, Beijing Engineering and Technology Research Center of Food Additives, Beijing Technology and Business University, Beijing, China) ,  Wu Tingting (Beijing Advanced Innovation Center for Food Nutrition and Human Health, Beijing Engineering and Technology Research Center of Food Additives, Beijing Technology and Business University, Beijing, China) ,  Sun Baoguo (Beijing Advanced Innovation Center for Food Nutrition and Human Health, Beijing Engineering and Technology Research Center of Food Additives, Beijing Technology and Business University, Beijing, China) ,  Wang Chengtao (Beijing Advanced Innovation Center for Food Nutrition and Human Health, Beijing Engineering and Technology Research Center of Food Additives, Beijing Technology and Business University, Beijing, China)
資料名： Annals of Microbiology  (Annals of Microbiology)
巻： 70  号： 1  ページ： 32  発行年： 2020年 
JST資料番号： W4038A  ISSN： 1869-2044  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： ドイツ (DEU)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 目的:クチナシブルーは,東アジアで長年に使用されている天然食品添加物の1つである。その生合成は,主にAspergillus niger(A.niger)細胞に存在する重要な律速セルラーゼ:β-グルコシダーゼ(BGL)に依存する。本研究の目的は,細胞工学法により活性なβ-グルコシダーゼを得ること,およびβ-グルコシダーゼとクチナシブルーの応用を促進し,コストを減少させる助けとなるクチナシブルー合成に適用することであった。【方法】A.nigerを18S rRNA遺伝子配列決定に基づいて同定した。β-グルコシダーゼ遺伝子をクローン化し,PCRと原核生物発現に基づいて発現した。β-グルコシダーゼの酵素活性をp-ニトロフェニル-β-D-グルコピラノシド法に基づいて測定した。結果:A.niger分離株(AS3.4523)を土壌から同定した。AS3.4523のβ-グルコシダーゼ遺伝子をクローン化し,配列決定した。それは,2つの特異的アミノ酸置換(Asp154GlyとSer163Pro)を含む新しいタイプのβ-グルコシダーゼ突然変異体をコードした。大腸菌BL21における野生型β-グルコシダーゼの原核生物発現は低セルラーゼ活性(0.29±0.13U/mL)を示した。しかしながら,そのシグナルペプチドを除去した後に,A.niger AS3.4523のβ-グルコシダーゼは,野生型β-グルコシダーゼ(12.59±1.07U/mL)または他のA.niger株M85(3.61±0.24U/mL)およびCICC2041(4.36±0.76U/mL)と比較して非常に高い活性(25.88±0.45U/mL)を示した。さらに,ゲニポシド加水分解に組換えβ-グルコシダーゼを適用し,ゲニピンとLysの反応によりクチナシ青色素を合成することに成功した。結論:本研究は,新しいタイプの高活性β-グルコシダーゼを発見し,大規模生産β-グルコシダーゼの理論的基礎を提供し,高効率と低コストのクチナシ青調製のための新しい基礎を築いた。Copyright The Author(s) 2020 Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *大腸菌 ,  加水分解 ,  生合成 ,  遺伝子 ,  酵素活性度 ,  色素 ,  セルラーゼ ,  *Aspergillus ,  *Aspergillus niger ,  クローン ,  シグナルペプチド ,  野生型 ,  *β-グルコシダーゼ
準シソーラス用語： アミノ酸置換 ,  遺伝子配列 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： Aspergillus niger ,  酵素活性 ,  クチナシ色素 ,  原核生物発現

分類 (1件)： 酵素一般  (EB09010D)

タイトルに関連する用語 (8件)： Escherichia ,  Aspergillus ,  活性 ,  β-グルコシダーゼ ,  発現 ,  Gardenia ,  調製 ,  応用