抄録/ポイント:
抄録/ポイント
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ヤクの未成熟卵母細胞の発育能力と卵丘-卵母細胞複合体(COCs)のトランスクリプトームに対するガラス化凍結-解凍の影響を検討し、ヤクのCOCs凍結保存技術の改善に理論的根拠を提供した。本研究では、未成熟培養したヤクのCOCsをガラス化凍結-解凍後2群に分け、A群;invitro成熟(IVM)後,invitro受精(IVF)を行い,C-1胚培養液中で72時間培養し,G-2培養液に96時間培養した。B群;IVF後、受精卵はG-1培養液で120時間培養後、G-2培養液に48時間培養した。対照群(C群)は,凍結処理のない新鮮なCOCsであった。IVF後、受精卵はG-1培養液で72時間培養後、G-2培養液に96時間培養した。ヤクの新鮮COCs(n=3)とガラス化凍結-解凍したCOCs(n=3)を増幅、ライブラリーとトランスクリプトームシークエンシング(RNA-seq)分析を行った。結果:B群の卵割率、嚢胚率はA群より明らかに高かった(P<0.05)が、A群とB群の卵割率、嚢胚率はC群より明らかに低かった(P<0.05)。|log2(foldchange)|≧2、Q<0.05を閾値とし、ヤクの凍結融解COCsは新鮮COCsに対して、851個の差次的発現遺伝子(DEGs)を選別し、そのうち846個をアップレギュレーションし、5個をダウンレギュレーションした。GO分析により、DEGsは主に生物過程、細胞成分及び分子機能3種類に濃縮され、KEGGアノテーションの結果、DEGsは258本の経路に濃縮され、そのうち16本の通路が著しい濃縮(P<0.05)を示した。研究により、IVF後、G-1培養液中で120時間培養するとヤクガラス化冷凍卵母細胞の後続発育能力を高めることができ、ガラス化冷凍はヤクCOCsトランスクリプトームに影響し、それによって卵母細胞の発育潜在力を低下させることが分かった。この発見はヤクのCOCsガラス化冷凍技術の改善に一定の理論基礎を提供した。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】