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J-GLOBAL ID:202102241262614423   整理番号:21A2112108

コムギにおける高分子量グルテニンサブユニットのハイスループット同定のための最適化MALDI-TOF-MS法の開発【JST・京大機械翻訳】

Development of an Optimized MALDI-TOF-MS Method for High-Throughput Identification of High-Molecular-Weight Glutenin Subunits in Wheat
著者 (7件):
資料名:
巻: 25  号: 18  ページ: 4347  発行年: 2020年 
JST資料番号: U7014A  ISSN: 1420-3049  CODEN: MOLEFW  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: スイス (CHE)  言語: 英語 (EN)
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高分子量グルテニンサブユニット(HMW-GS)はコムギ最終利用品質に重要な寄与因子であるので,コムギ遺伝資源および育種系統におけるHMW-GSのハイスループット同定の必要性がある。蛋白質抽出,溶媒成分,溶解体積及びマトリックスII成分におけるアルキル化試薬の影響を考慮することにより,個々のHMW-GSを区別するためのマトリックス支援レーザ脱離/イオン化飛行時間質量分析(MALDI-TOF-MS)を用いた最適化法を開発した。最適化した方法を用いて,22のHMW-GSの18を,分子量の差によって,または他の緊密にリンクしたサブユニットとのそれらの関連によって,標準コムギ品種において首尾よく同定した。興味深いことに,1Bx7サブユニットを1Bx7グループ1と1Bx7グループ2蛋白質に分け,分子量はそれぞれ約82,400と83,000Daであった。1Bx7グループ2蛋白質を含む栽培品種は,よく知られたDNAマーカーを用いて1Bx7OEを含むそれらと区別された。HMW-GS 1Ax2*および1Bx6および1By8*は,非常に類似した分子量により識別するのが困難であり,RP-HPLCを用いて容易に同定された。方法を検証するために,RP-HPLCと組み合わせたSDS-PAGEによって以前に評価された38の韓国コムギ品種からのHMW-GSをMALDI-TOF-MSによって分析した。最適化したMALDI-TOF-MS法は,育種努力のために望ましいHMW-GSを含む系統を選択するための迅速でハイスループットなツールである。Copyright 2021 The Author(s) All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (3件):
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生化学的分析法  ,  植物の生化学  ,  質量分析 
引用文献 (53件):
  • Payne, P.I. Genetics of wheat storage proteins and the effect of allelic variation on breadmaking quality. Annu. Rev. Plant. Physiol. 1987, 38, 141-153.
  • Payne, P.I.; Holt, L.M.; Law, C.N. Structural and genetical studies on the high-molecular-weight subunits of wheat glutenin. Theor. Appl. Genet. 1981, 60, 229-236.
  • Shewry, P.R.; Halford, N.G.; Tatham, A.S. High molecular weight subunits of wheat glutenin. J. Cereal. Sci. 1992, 15, 105-120.
  • Payne, P.I.; Lawrence, G.J. Catalogue of alleles for the complex gene loci Glu-A1, Glu-B1 and Glu-D1 which code for high-molecular weight subunits of glutenin in hexaploid wheat. Cereal. Res. Commun. 1983, 11, 29-35.
  • Barro, F.; Rooke, L.; Bekes, F.; Gras, P.; Tatham, A.S.; Fido, R.; Lazzeri, P.A.; Shewry, P.R.; Barcelo, P. Transformation of wheat with HMW subunit genes results in improved functional properties. Nat. Biotechnol. 1997, 15, 1295-1299.
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