ガイド相補性DNAオリゴヌクレオチドを用いたCRISPR-Casゲノム編集の調節【JST・京大機械翻訳】

Swartjes, T.; Shang, P.; van den Berg, D.; Kunne, T. A.; Geijsen, N.; Brouns, S. J. J.; van der Oost, J.; Staals, R.; Notebaart, R. A.

プレプリント

J-GLOBAL ID：202202201488384953 整理番号：22P0032675

ガイド相補性DNAオリゴヌクレオチドを用いたCRISPR-Casゲノム編集の調節【JST・京大機械翻訳】

Modulating CRISPR-Cas genome editing using guide-complementary DNA oligonucleotides

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発行年： 2022年01月15日プレプリントサーバーでの情報更新日： 2022年01月15日
JST資料番号： O7001B 資料種別：プレプリント
記事区分：プレプリント発行国：アメリカ合衆国 (USA) 言語：英語 (EN)

CRISPR-Casはゲノム編集を革命し,ヒトの遺伝的障害の補正のような応用に大きな可能性を有する。ゲノム編集応用の安全性を増すために,CRISPR-CasはCas酵素活性の厳密な制御から恩恵を受ける。以前に,抗CRISPR蛋白質および設計されたオリゴヌクレオチドは,CRISPR-Cas活性を調節するために提案されている。ここでは,Cas9リボ核蛋白質複合体の制御阻害剤としてのガイド相補DNAオリゴヌクレオチドの可能性について報告する。最初に,DNAオリゴヌクレオチドがヒト細胞でCas9活性をダウンレギュレートし,標的切断とオフ標的切断の両方を減少させることを示した。次に,in vitroアッセイを用いて,阻害がどのように達成されるかをよりよく理解し,その条件下で,その阻害がどのように達成されるかをよりよく理解した。2つの因子は,相補的領域の長さ,および阻害剤上のPAMループの存在の堅牢な阻害に重要であることが分かった。DNAオリゴヌクレオチドはex vivoとin vitroの両方でCas9活性を効果的に阻害できると結論した。【JST・京大機械翻訳】

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, , , , 【Automatic Indexing@JST】

遺伝子発現 , 遺伝子操作

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