抄録/ポイント:
抄録/ポイント
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T細胞は感染,炎症および癌に対する適応免疫応答において重要な役割を果たし,自己免疫において調節不全である。T細胞による抗原認識は,T細胞受容体(TCR)-CD3複合体により適応免疫応答における重要段階である。{β}TCR周辺の個々のCD3サブユニット(CD3{デルタ}→ΔΨ}とCD3{γγ′var}}の細胞外分子組織化はT細胞シグナル伝達に重要である。ここでは,特異的マウスTCR,TCR{β},CD3{デルタ}およびCD3{γ}部位で,非天然アミノ酸(UAA)光架橋剤を,以前の変異誘発,NMR分光法およびクライオ-EM証拠に基づいて取り込んだ,そして,架橋により,哺乳動物細胞表面の近くの相互作用CD3またはTCRサブユニットを同定した。このアプローチを用いて,CD3{γ}とCD3{var}がC{ベータ}FGループとC{ベータ}G鎖に架橋し,CD3{デルタ}架橋がC{ベータ}CCループとCDEループに架橋することを示した。コンピュータドッキングと共に,in situ細胞表面立体配座において,CD3サブユニットが{ベータ}TCRのまわりでCD3{var}-CD3{γ}-CD3{var}-CD3{デルタ}配列に存在することを同定した。天然哺乳類細胞表面微小環境を用いたこの非在来型技術は,細胞膜を含み,ランダム,人工架橋を除外し,TCR-CD3複合体の動的,生物学的関連,細胞-表面立体配座を捕捉し,これは,報告されている静的クライオ-EM構造全体CD3サブユニット配列と両立するが,TCR-CD3界面で重要な違いがあり,T細胞モデル系での実験に重要である。【JST・京大機械翻訳】