精密in vivo編集のためのCas9融合【JST・京大機械翻訳】

Richardson, R. R.; Steyert, M.; Khim, S. N.; Romanowski, A. J.; Inen, J.; Altas, B.; Poulopoulos, A.

プレプリント

J-GLOBAL ID：202202203246674143 整理番号：22P0027920

精密in vivo編集のためのCas9融合【JST・京大機械翻訳】

Cas9 fusions for precision in vivo editing

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発行年： 2022年01月07日プレプリントサーバーでの情報更新日： 2022年01月07日
JST資料番号： O7001B 資料種別：プレプリント
記事区分：プレプリント発行国：アメリカ合衆国 (USA) 言語：英語 (EN)

Cas9は,高い特異性を有するゲノム遺伝子座を標的とする。しかしながら,ノッキングに使用される場合,Cas9は意図された編集よりも意図的に意図しない標的ノックアウトをもたらす。この不正確性は,クローン選択が不可能な直接in vivo編集の障壁である。ここでは,標的効率および編集結果の精度をレシオメトリックに評価する高スループットワークフローを示した。このワークフローを用いて,DNA修復蛋白質への融合と同様に,ドナーDNAとCas9変異体の組み合わせをスクリーニングした。これは新規高性能二本鎖切断修復編集剤とノッキング精度の桁増加による組合せ最適化をもたらした。Cas9-RC,eRad18とCtIPへの新規Cas9融合は,in vitroで3倍,in vivoでノッキング性能を増加させた。効率および精度のこのレシオメトリックフレームワークを有する既存および新規編集剤の連続比較評価は,さらに,直接in vivoノッキングおよび将来の遺伝子治療の開発を,さらに行うであろう。【JST・京大機械翻訳】

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, , , 【Automatic Indexing@JST】

遺伝子操作

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