HEK293E細胞における組換抗体産生の増強:トランスフェクションと培養パラメータの最適化【JST・京大機械翻訳】

Heng, Z. S.-L.; Yeo, J. Y.; Koh, D. W.-S.; Gan, S. K.-E.; Ling, W.-L.

プレプリント

J-GLOBAL ID：202202206407315610 整理番号：21P0271769

HEK293E細胞における組換抗体産生の増強:トランスフェクションと培養パラメータの最適化【JST・京大機械翻訳】

Augmenting Recombinant Antibody Production in HEK293E Cells: Optimising Transfection and Culture Parameters

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発行年： 2022年01月04日プレプリントサーバーでの情報更新日： 2022年01月04日
JST資料番号： O7001B 資料種別：プレプリント
記事区分：プレプリント発行国：アメリカ合衆国 (USA) 言語：英語 (EN)

※このプレプリント論文は学術誌に掲載済みです。なお、学術誌掲載の際には一部内容が変更されている可能性があります。

【背景】組換え抗体産生の最適化は,費用対効果の高い治療法および診断にとって重要である。商品化への影響により,実験室規模を超える高い生産性が高度に求められ,効率的な生産も抗体の特性化と研究を加速することができる。【方法】哺乳類抗体産生のためのHEK293E細胞を調査して,種々のトランスフェクションと培養パラメータを,抗体産生のためにそれらを評価する前に,抗体軽鎖産生のために系統的に分析した。調査したトランスフェクションパラメーターは,播種細胞密度,トランスフェクション試薬とDNAの濃度,複合体形成時間,温度,および体積,ならびに培地置換,血清欠乏,細胞維持抗生物質の使用,培養温度,培地量,ポストトランスフェクション収穫日,および一般的栄養補給などの培養パラメータを含む。【結果】2mLの接着HEK293E細胞培養トランスフェクションを,最も最適化されたパラメータで25kDaの線状ポリエチレンイミンで用いて,著者らは,光鎖単独の2倍の生産増加と,それぞれ536と49gに達する全抗体産生を,費用対効果に優れた方法で実証した。ペプトンの添加により,{κ}軽鎖は4倍から1032gに増加し,一方,全抗体は,約2.5倍から51gまで減少し,生産における光鎖によって制限された抗体に潜在的利点があった。【結論】著者らの最適化所見は,トランスフェクションおよび培養最適化を通して,より効率的で便利な抗体産生法に対して有望であり,それは,HEK293E細胞を用いた他の哺乳類ベースの組換蛋白質生産への,スケールアッププロセスおよび潜在的移植性に組み込むことができる。Significance Recombinant抗体産生の状態は抗体研究と開発に重要である。PEI/DNA濃度,錯化時間,体積および温度,サプリメントなどのトランスフェクションおよび培養パラメーターを系統的に調査して,4倍軽鎖単独生産が1032gに増加,2.5倍全抗体産生が2mLトランスフェクションから51gに増加したことを示した。【JST・京大機械翻訳】

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遺伝子操作

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