NMRによる立体配座動力学研究のためのRNAへの同位体標識アデニンの純酵素的取込【JST・京大機械翻訳】

Feyrer, H.; Gurdap, C. O.; Marusic, M.; Schlagnitweit, J.; Petzold, K.

プレプリント

J-GLOBAL ID：202202206493413475 整理番号：22P0315558

NMRによる立体配座動力学研究のためのRNAへの同位体標識アデニンの純酵素的取込【JST・京大機械翻訳】

Purely enzymatic incorporation of an isotope-labeled adenine into RNA for the study of conformational dynamics by NMR

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発行年： 2022年02月16日プレプリントサーバーでの情報更新日： 2022年02月16日
JST資料番号： O7001B 資料種別：プレプリント
記事区分：プレプリント発行国：アメリカ合衆国 (USA) 言語：英語 (EN)

溶液NMR分光法は,RNA分子の構造研究に対するユニークな利点を有する十分に確立されたツールである。しかし,大きなRNA配列では,NMR共鳴はしばしば重なる。共鳴帰属を遂行し,スペクトル密集にもかかわらず更なる分析を可能にする信頼できる方法は,試料調製における部位特異的同位体標識の使用である。固相オリゴヌクレオチド合成にはいくつかの利点があるが,同位体標識ビルディングブロックのRNA長とアベイラビリティは持続的問題である。純粋に酵素的方法は代替として生じ,文献に示されている。本研究では,RNAの5-標識を可能にする5つの位置に対する三リン酸のヌクレオチド一リン酸に対するT7 RNAポリメラーゼの優先性を利用する方法について報告する。非標識RNA鎖への逐次ライゲーションは部位特異的標識RNAを生成する。NMR研究に対するこのようなRNA試料の成功した生産を示し,実験的詳細と期待収率を報告し,RNA構造における立体配座交換を明らかにする以前に隠されたピーク集合の驚くべき知見を示した。本研究は,酵素法によるRNAの部位特異的同位体標識の実現可能性を強調する。【JST・京大機械翻訳】

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核酸一般

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