抄録/ポイント：
抄録/ポイント
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ヘルペスウイルス1(HSV-1)は,大きなエンベロープDNAウイルスであり,細胞におけるその集合は,ウイルス粒子が分泌経路の核やオルガネラのような多数の細胞区画と相互作用する複雑な多段階過程である。透過型電子顕微鏡と蛍光顕微鏡は,HSV-1感染を研究するために一般的に使用される。しかし,2Dイメージングは,感染および試料処理を伴う細胞コンパートメントへの3D幾何学的変化の理解を限定し,解釈を複雑にする形態学的アーチファクトを導入することができる。この研究では,軟X線トモグラフィーを用い,HSV-1感染と非感染細胞の間の全細胞構造の違いを観察した。細胞区画の近天然構造を保護するために,迅速凍結保存を含む非破壊試料調製技術を用い,蛍光レポーターウイルスを用いて,個々の細胞における感染の段階と構造変化の相関を促進した。核および細胞質膜と相互作用するウイルスカプシドおよび集合中間体を観察した。さらに,非感染細胞と感染細胞の間の特異的オルガネラの形態の違いを観察した。感染が進むにつれて,傍核区画での細胞質小胞の局所濃度は増加し,それらの平均幅は減少し,脂質滴はサイズで一時的に増加した。さらに,感染細胞におけるミトコンドリアは伸長し,高度に分岐しており,HSV-1感染がミトコンドリア分裂/融合の動力学を変化させることを示唆した。著者らの結果は,細胞区画の高解像度3D画像が軟X線トモグラフィーを用いて近天然状態で捕捉され,感染が細胞内オルガネラの形態に著しい変化を引き起こすことを明らかにした。単純ヘルペスウイルス1(HSV-1)感染時の細胞区画の形態および組織への重要性Ultra構造変化は,近生理的条件下で以前には研究されていない。本研究では,軟X線トモグラフィーを用いて,HSV-1感染時のガラス化細胞の超微細構造を画像化し,細胞質小胞とミトコンドリアの豊度と組織化への顕著な変化を同定した。核周辺領域の小胞濃度は,感染後の時間と共に増加し,カプシド包囲を支持する小胞の供給増加を示し,感染細胞での脂質滴のサイズに一時的な増加があった。さらに,ミトコンドリアが伸長し,感染の進行とともに高度に分枝したネットワークを形成することを示した。これらの知見は,ビリオン形態形成の段階と感染に対する細胞応答への洞察を提供し,感染細胞の近天然状態超微細構造を監視するためのクライオ-ソフト-X線トモグラフィーの有用性を強調した。【JST・京大機械翻訳】
