抄録/ポイント:
抄録/ポイント
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アシネトバクターbaumanniiに対する構造synopsisO_ST_ABSBackgroundC_ST_ABSは,選択マーカーまたは残留配列を残すか,あるいは退屈な対選択とスクリーニング段階を含む。さらに,それらは多剤耐性(MDR)臨床分離株よりもモデル株に通常適応されている。【目的】MDR A.baumannii AB5075における染色体およびプラスミド修飾に適した瘢痕のないゲノム編集ツールを開発する。【方法】著者らは,多剤排出ポンプcraAとcmlA5を削除して,また,プラスミドp1AB5075を硬化することによって,著者らの適応ゲノム編集システムの効率を証明した。次に,ディスク拡散アッセイによりクロラムフェニコール,トブラマイシンおよびアミカシンに対する野生型と比較して変異体の抗生物質感受性表現型を特性化し,各株に対する最小発育阻止濃度を決定した。【結果】著者らは,A.baumannii AB5075にゲノム編集プロトコルを首尾よく適用し,100%に近い二重組換え頻度を達成し,10の作業日以内で突然変異体の構築を確保した。さらに,{Delta}craAはクロラムフェニコール,トブラマイシン及びアミカシンに対して強い感受性を持つが,{Delta}cmlA5変異体は試験した抗生物質に対する生存率の有意な低下を示さないことを示した。一方,p1AB5075の除去はトブラマイシンとアミカシンに対する感受性を増加させた。結論:A.baumanniiのための高効率ゲノム編集ツールを適応させ,craAが以前に考えられていたよりも広い基質範囲を有することを証明した。一方,cmlA5はクロラムフェニコール排出ポンプとして注釈され,アミノグリコシド耐性島内でコードされるが,これらの化合物の耐性は与えない。【JST・京大機械翻訳】