線形二本鎖DNAベース戦略による哺乳類細胞における高含量ナノボディライブラリーの構築【JST・京大機械翻訳】

Zhao, Y.; Su, W.; Li, S.

プレプリント

J-GLOBAL ID：202202207564997615 整理番号：22P0238036

線形二本鎖DNAベース戦略による哺乳類細胞における高含量ナノボディライブラリーの構築【JST・京大機械翻訳】

Construction of High Content Nanobody Library in Mammalian Cells by Linear-double-stranded DNA Based Strategies

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発行年： 2020年06月12日プレプリントサーバーでの情報更新日： 2020年06月12日
JST資料番号： O7001B 資料種別：プレプリント
記事区分：プレプリント発行国：アメリカ合衆国 (USA) 言語：英語 (EN)

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ここでは,哺乳類細胞で高含量のナノボディライブラリーを構築するための2種類の新しい方法を開発した。第一の方法では,線形二本鎖DNAベースのANDゲート(LBAG)戦略を用いた。同一重複配列を含む上流及び下流線形二本鎖DNA(ldsDNA)を培養細胞株に共トランスフェクトし,無傷のナノボディ発現カセットを形成するAND-ゲート計算を実施した。第2の方法では,著者らは,制限切断および下流ldsDNAのin vitroライゲーションにより完全長ナノボディ発現ldsDNAを作成した。次に,ldsDNAsは,ナノボディライブラリーを発現するために哺乳類細胞に直接トランスフェクションした。両方法は,ハイスループット配列決定(HTS)により明らかにされたように,数百万の異なるナノボディ配列上に生成した。【JST・京大機械翻訳】

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核酸一般 , 遺伝子操作

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