PAMless CRISPR-SpRYゲストによる正確なDNAクローニング【JST・京大機械翻訳】

Christie, K. A.; Guo, J. A.; Silverstein, R. A.; Doll, R. M.; Mabuchi, M.; Stutzman, H. E.; Ma, L.; Robb, G. B.; Kleinstiver, B. P.

プレプリント

J-GLOBAL ID：202202207823414437 整理番号：22P0032203

PAMless CRISPR-SpRYゲストによる正確なDNAクローニング【JST・京大機械翻訳】

Precise DNA Cloning via PAMless CRISPR-SpRYgests

出版者サイト {{ this.onShowPLink() }} 複写サービスで全文入手
高度な検索・分析はJDreamⅢで

この文献はプレプリントです。プレプリントについてはこちらをご確認ください。

著者 (9件)： , , , , , , , ,
資料名：
発行年： 2022年01月12日プレプリントサーバーでの情報更新日： 2022年01月12日
JST資料番号： O7001B 資料種別：プレプリント
記事区分：プレプリント発行国：アメリカ合衆国 (USA) 言語：英語 (EN)

制限酵素(RE)はin vitroでDNAを操作するための金標準のままであるが,DNA基質を切断する能力を制約する短い結合モチーフへの依存性を含む顕著な欠点がある。ここでは,実際に任意の配列でDNAを切断するためにSpRYと名付けたCRISPR-Cas酵素のPAMレス性質を利用する最適化分子ワークフローを開発することによりREの限界を克服した。DNA消化物(SpRYゲストs)に対するSpRYを用いて,任意の塩基対でDNA基質の効率的な切断を可能にする方法を確立した。130gRNA以上のSpRYゲストの有効性を実証し,REsで不可能なものを含む,いくつかのクローニングワークフローの精度を改善し,単純化するためのこのアプローチの多用途性を示した。また,迅速で簡単なワンポットgRNA合成プロトコルを最適化し,コストを低減し,全SpRYゲストワークフローをRE消化物に匹敵するようにした。まとめると,SpRYゲストは実行が簡単で,様々なDNA工学応用の改善に利用できる。【JST・京大機械翻訳】

, , , , , , , , , , , ,
, , , 【Automatic Indexing@JST】

微生物の生化学 , 遺伝子発現

, ,

前のページに戻る