チャイニーズハムスター卵巣細胞における一過性光活性化遺伝子発現【JST・京大機械翻訳】

Minami, S. A.; Shah, P. S.

プレプリント

J-GLOBAL ID：202202211291692058 整理番号：22P0251258

チャイニーズハムスター卵巣細胞における一過性光活性化遺伝子発現【JST・京大機械翻訳】

Transient light-activated gene expression in Chinese hamster ovary cells

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発行年： 2020年10月23日プレプリントサーバーでの情報更新日： 2020年10月23日
JST資料番号： O7001B 資料種別：プレプリント
記事区分：プレプリント発行国：アメリカ合衆国 (USA) 言語：英語 (EN)

※このプレプリント論文は学術誌に掲載済みです。なお、学術誌掲載の際には一部内容が変更されている可能性があります。

【背景】チャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞は,バイオ医薬品の工業生産に広く使用されている。多くの遺伝的,化学的および環境的アプローチが,力価を改善するために細胞経路を調節するために開発されている。しかし,これらの方法は,しばしば不可逆的またはオフターゲット効果を有する。正確で,調節可能で,可逆的である技術の開発は,力価を最大化するための標的経路の時間的調節を促進するであろう。本研究では,CHO細胞における光遺伝学の使用を検討した。光活性化CRISPR-dCas9エフェクター(LACE)系を,光誘導様式でeGFPを発現するために最初に一時的にトランスフェクトした。次に,安定システムをレンチウイルス形質導入を用いて試験した。【結果】一過性トランスフェクションは,LED強度の関数としてeGFP発現の増加をもたらし,48時間の活性化は,暗所に保たれた細胞と比較して,eGFP発現を4倍増加させた。蛍光はLACE系が不活性化されると減少し,14.9時間の半減期が計算され,これは文献で報告された値と一致した。LACE系を安定に発現する細胞では,eGFP発現を確認したが,光活性化後の発現の有意な増加はなかった。結論:これらの結果から,オプトジェネティクスはCHO細胞培養を調節することができるが,安定な細胞株の開発は高いダイナミックレンジを維持するためにLACE成分の最適発現レベルを必要とすることが示唆された。【JST・京大機械翻訳】

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遺伝子操作 , 細胞生理一般

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