プレプリント
J-GLOBAL ID:202202212265997122   整理番号:22P0314420

キメラa-サブユニットイソ型はin vitroおよびin vivoで調節特性が変化した機能的酵母V-ATPアーゼを生成する【JST・京大機械翻訳】

Chimeric a-subunit isoforms generate functional yeast V-ATPases with altered regulatory properties in vitro and in vivo
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発行年: 2022年07月09日  プレプリントサーバーでの情報更新日: 2022年07月09日
JST資料番号: O7001B  資料種別: プレプリント
記事区分: プレプリント  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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V-ATPアーゼはオルガネラを酸性化する高度に調節されている多サブユニットプロトンポンプである。V-ATPアーゼaサブユニットは,プロトン輸送に関与するC末端膜貫通ドメイン及び調節ハブとして作用するN末端サイトゾルドメイン(aNT)を含む2ドメイン蛋白質であり,集合,局在及びV-ATPアーゼ活性を調節する環境入力を統合する。組織及びオルガネラ特異的サブユニットイソ型は大部分の生物に存在するが,調節入力がNTイソ型により解読される方法は未知である。酵母S.cerevisiaeは2つのオルガネラ特異的a-イソ型,ゴルジにおけるStv1及び液胞におけるVph1のみをコードする。最近の構造に基づき,球状近位および遠位末端が交換されるキメラ酵母aNTsを設計した。Vph1近位-Stv1遠位(VPSD)aNTキメラは,in vitroでグルコース反応性RAVE集合因子に結合するが,V-ATPアーゼを活性化するホスホイノシチド脂質とはほとんど結合しない。Stv1近位-Vph1遠位(SPVD)aNTはRAVE結合を欠くが,Vph1またはStv1よりホスホイノシチドとより強固に結合する。in vivoでVph1C末端ドメインに付着すると,両キメラはvph1{Delta}変異体の成長欠損を相補するが,SPVDキメラのみが野生型V-ATPアーゼ活性を示す。SPVDキメラを含む細胞は野生型細胞よりも貧弱な炭素源にゆっくり適応したが,アルカリ性pHへのシフト後に野生型より急速に増殖した。これは,制御された調節特性と特異的ストレスへの適応を有する「再設計」V-ATPアーゼの最初の例である。【JST・京大機械翻訳】
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分類 (1件):
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酵素一般 

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