バイオリスティックスによるCRISPR-Cas9コムギ(Triticum aestivum L.)ゲノミクスシステムにおける遺伝子デリバリーと突然変異効率の改良【JST・京大機械翻訳】

Tanaka, J.; Minkenberg, B.; Poddar, S.; Staskawicz, B.; Cho, M.-J.

プレプリント

J-GLOBAL ID：202202212453132236 整理番号：22P0330922

バイオリスティックスによるCRISPR-Cas9コムギ(Triticum aestivum L.)ゲノミクスシステムにおける遺伝子デリバリーと突然変異効率の改良【JST・京大機械翻訳】

Improvement of Gene Delivery and Mutation Efficiency in the CRISPR-Cas9 Wheat (Triticum aestivum L.) Genomics System via Biolistics

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発行年： 2022年04月10日プレプリントサーバーでの情報更新日： 2022年04月10日
JST資料番号： O7001B 資料種別：プレプリント
記事区分：プレプリント発行国：アメリカ合衆国 (USA) 言語：英語 (EN)

CRISPR-Cas9遺伝子編集システムの発見は植物ゲノムの分野を革命した。gRNAの設計の容易さとCRISPR-Cas9システムの低コストの利点にもかかわらず,特に六倍体コムギにおいて,低突然変異効率で克服するハードルがある。遺伝子デリバリーおよび形質転換頻度と共に,突然変異率ボトルネックは,コムギのゲノム編集における進歩を遅くする可能性を有する。本研究では,3つの金粒径と3つの破断ディスク圧力を用いた9つの衝撃パラメータ組合せを試験し,コムギにおける最適安定変換頻度を確立した。フィトエンデサチュラーゼ遺伝子の最良の形質転換プロトコルとノックアウトカセットを利用して,形質転換胚を4つの温度処理に供し,突然変異効率を比較した。衝撃に対する0.6mの金粒子の使用は,すべての供給圧力にわたって変態周波数を増加させた。24時間にわたる34{度}Cの熱処理は,形質転換頻度の低下または最小の減少で最も高い突然変異効率をもたらした。34の{度}C処理はアルビノ表現型を持つ2つのM0変異体事象を生成し,六倍体コムギの3つのゲノム全てにおいて二対立遺伝子変異を必要とした。最適形質転換と熱処理パラメータの利用は突然変異効率を大きく増大させ,コムギゲノムにおける研究努力の進歩を助けることができる。【JST・京大機械翻訳】

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遺伝子操作

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