神経毒性学のためのヒト胚性幹細胞のロバストで再現性のある神経分化【JST・京大機械翻訳】

Samara, A.; Falck, M.; Spildrejorde, M.; Leithaug, M.; Acharya, G.; Lyle, R.; Eskeland, R.

プレプリント

J-GLOBAL ID：202202212967738184 整理番号：22P0313463

神経毒性学のためのヒト胚性幹細胞のロバストで再現性のある神経分化【JST・京大機械翻訳】

Robust and reproducible neuronal differentiation of human embryonic stem cells for neurotoxicology

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発行年： 2022年01月28日プレプリントサーバーでの情報更新日： 2022年01月28日
JST資料番号： O7001B 資料種別：プレプリント
記事区分：プレプリント発行国：アメリカ合衆国 (USA) 言語：英語 (EN)

多能性細胞からの神経分化は,初期脳発達における事象を再現するために一般的に使用される。神経前駆体およびin vivoで培養されたニューロンの開発は,接着,密度および細胞対細胞コミュニケーションに依存し,細胞通過段階はネットワーク交差連結性の逆破壊に最小化されるべきである。これは生存率と成熟の両方にとって重要であり,前者はヒト胚性幹細胞(hESC)にも適用される。したがって,神経毒性評価研究のためのhESCからの神経分化プロトコルは,標準化された細胞密度要件を提供し,コーティングマトリックス条件を最適化するべきである。薬物処理の効果は,細胞培養培地における化合物不安定性と分解によってマスクされるかもしれないが,毎日の培地変化を実行することは,これらの問題を回避することができる。ここでは,hESCの神経誘導に対し,二重SMAD/WNTシグナリング阻害剤LDN193189,SB431542およびXAV939(LSX)を用い,腹側終脳前駆体およびニューロンの生成に対し,自己パターン化および細胞成熟段階が続く,頑健なニューロン分化プロトコールを述べた。最適化した細胞培養パラメーターと段階特異的検証の標準化方法に関する重要な情報を提供した。細胞計数,免疫蛍光法,qRT-PCR法,および薬物誘発細胞毒性による症例問題を示すバルプロ酸による原理治療の証明を用いて,プロトコルの再現性を容易にした。グラフ抽象的O_FIG O_LINKSMALLFIG WIDTH=200HEIGHT=193SRC=”FIGDIR/小/477818v1_ufig1.gif”ALT=”Figure 1”>View version(43K):org.highwire.dtl.DTLVardef@19f0f89org.highwire.dtl.DTLVardef@1b4feaorg.highwire.dtl.DTLVardef@1bb832borg.highwire.dtl.DTLVardef@1a07efd_HPS_FORMAT_FIGEXP M_FIG C_FIG。【JST・京大機械翻訳】

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細胞生理一般 , 細胞・組織培養法 , 発生と分化

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