高速原子間力顕微鏡によるCENP-Aクロマチンの単一分子解析【JST・京大機械翻訳】

Melters, D. P.; Neuman, K. C.; Rakshit, T.; Dalal, Y.

プレプリント

J-GLOBAL ID：202202213848307953 整理番号：22P0031664

高速原子間力顕微鏡によるCENP-Aクロマチンの単一分子解析【JST・京大機械翻訳】

Single Molecule Analysis of CENP-A Chromatin by High-Speed Atomic Force Microscopy

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発行年： 2023年02月08日プレプリントサーバーでの情報更新日： 2023年02月08日
JST資料番号： O7001B 資料種別：プレプリント
記事区分：プレプリント発行国：アメリカ合衆国 (USA) 言語：英語 (EN)

クロマチンアクセシビリティは,真核生物遺伝子調節に重要である,開放および閉鎖クロマチン状態を生じる各種の方法で調節されている。単一分子レベルでは,カノニカルまたは変異体ヌクレオソームから成るクロマチン線維においてアクセシビリティがどのように調節されるかは,この分野における基本的問題である。ここでは,高速原子間力顕微鏡により画像化された数千の正準H3および動原体変異体ヌクレオソームを分析できる単一分子追跡法を開発した。このアプローチにより,in vitroでのヌクレオソーム動力学の変化がin vivoでのクロマチン接近性についてin vitroでどのように変化するかを調べることができた。高速原子間力顕微鏡により,リアルタイムでクロマチン動態を追跡し,変異動原体CENP-AヌクレオソームのMSDと拡散定数を決定した。さらに,必須キネトコア蛋白質CENP-Cはクロマチン線維に沿った動原体ヌクレオソームの拡散定数と移動性を低下させる。次いで,CENP-Cがin vivoでCENP-Aクロマチン動態をどのように調節するかを調べた。CENP-Cの過剰発現は,中心体転写の減少と新しいCENP-A分子の負荷の障害をもたらした。したがって,クロマチンのアクセシビリティをin vitroで変化させる変化は,in vivoで転写を対応させる。これらのデータは,変異ヌクレオソームが自身の拡散動力学と移動性をコード化し,結合パートナーが移動性を抑制または増強できるモデルを示唆する。【JST・京大機械翻訳】

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, , , , 【Automatic Indexing@JST】

細胞構成体一般 , 遺伝子発現

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