単一ハプテン特異的ウサギ抗体分泌細胞の間接競合スクリーニングに基づく希少モノクローナル抗体の発見【JST・京大機械翻訳】

Li, Y.; Li, P.; Ke, Y.; Yu, X.; Yu, W.; Wen, K.; Shen, J.; wang, z.

プレプリント

J-GLOBAL ID：202202214635181316 整理番号：22P0334641

単一ハプテン特異的ウサギ抗体分泌細胞の間接競合スクリーニングに基づく希少モノクローナル抗体の発見【JST・京大機械翻訳】

Rare Monoclonal Antibody Discovery Based on Indirect Competitive Screening of Single Hapten-specific Rabbit Antibody Secreting Cell

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発行年： 2022年04月15日プレプリントサーバーでの情報更新日： 2022年04月15日
JST資料番号： O7001B 資料種別：プレプリント
記事区分：プレプリント発行国：アメリカ合衆国 (USA) 言語：英語 (EN)

物理化学的因子に耐えることができる希少抗体は,診断および治療において好まし,高度に要求されている。ウサギモノクローナル抗体(RmAb)は,それらの高い親和性と安定性のために区別される。しかし,RmAb発見のための従来法の効率とアベイラビリティは,特に小分子に対して制限される。ここでは,20.6hで単一ウサギ抗体分泌細胞(ASC)選択のためのCSMNと名付けたナノウェルにおける間接競合スクリーニング法を提示し,初めて5.8日間小分子に対するRmAb産生のための効率的なプラットフォームを提案した。抗菌剤としてのクロラムフェニコール(CAP)は公衆衛生に大きな脅威を持つ。CSMNをCAP特異的ASCを選択し,1つの高親和性RmAbを産生し,驚くべきことに,他の抗体によっては示されていない飽和塩溶液中で0.08ng mL ̄-1のIC_50で非常に好塩性を示す。分子動力学シミュレーションは,負に荷電した表面が,マウス抗体と比較して,追加のジスルフィド結合を有するRmAb構造の安定性を改善することを示した。さらに,結合ポケットの減少した溶媒アクセス可能表面積は飽和塩溶液中のCAPとRmAbの相互作用を増加させた。さらに,RmAbを用いて,単純な前処理,短いアッセイ時間,およびより高い感度を有する実際の生体試料中のCAPの検出のための免疫アッセイを開発した。結果は,実用的で効率的なCSMNが小分子に対する稀なRmAb発見に適していることを示した。【JST・京大機械翻訳】

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抗原・抗体・補体の生産と応用

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