定量的蛍光寿命バイオセンサによる細胞内pHの解明【JST・京大機械翻訳】

Rennick, J. J.; Nowell, C. J.; Pouton, C. W.; Johnston, A. P. R.

プレプリント

J-GLOBAL ID：202202215132284165 整理番号：22P0334451

定量的蛍光寿命バイオセンサによる細胞内pHの解明【JST・京大機械翻訳】

Resolving subcellular pH with a quantitative fluorescent lifetime biosensor

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発行年： 2022年04月13日プレプリントサーバーでの情報更新日： 2022年04月13日
JST資料番号： O7001B 資料種別：プレプリント
記事区分：プレプリント発行国：アメリカ合衆国 (USA) 言語：英語 (EN)

細胞内pHの変化は,代謝,細胞増殖,膜輸送において重要な役割を果たし,また,治療デリバリーシステムからのカーゴ放出を制御するために利用できる。pHを測定するほとんどの方法はpH感受性フルオロフォアの強度変化に依存するが,これらの測定は推定pHにおける高い不確実性と多重フルオロフォアの必要性によって妨げられる。これに対処するために,著者らは,蛍光寿命イメージング顕微鏡(pHLIM)を用いて,個々の小胞における細胞内pHを正確に定量化する方法を開発した。pHLIMは蛍光蛋白質mAppleの線形pH依存性寿命を利用し,深部学習モデルを用いて細胞内区画のpHを自動的に同定及び測定した。サイトゾル,エンドソーム,リソソームのpHを測定するために,mApple融合蛋白質を操作し,薬物(バフィロマイシンA1)とポリエチレンイミン(一般的トランスフェクション試薬)により誘導されるpH変化を測定することにより,pHLIMの有用性を実証した。pHLIMは,制御薬物放出システムの次世代の設計を助け,薬物作用と疾患進行を理解するための可能性を有する細胞内pHを測定する簡単で定量的な方法である。【JST・京大機械翻訳】

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生体の顕微鏡観察法 , 生物物理的研究法

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