放線菌の代謝工学のための単一細胞変異体選択【JST・京大機械翻訳】

Akhgari, A.; Baral, B.; Koroleva, A.; Siitonen, V.; Fewer, D. P.; Melancon, C. E.; Rahkila, J.; Metsa-Ketela, M.

プレプリント

J-GLOBAL ID：202202215978815490 整理番号：22P0032482

放線菌の代謝工学のための単一細胞変異体選択【JST・京大機械翻訳】

Single cell mutant selection for metabolic engineering of actinomycetes

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発行年： 2022年01月14日プレプリントサーバーでの情報更新日： 2022年01月14日
JST資料番号： O7001B 資料種別：プレプリント
記事区分：プレプリント発行国：アメリカ合衆国 (USA) 言語：英語 (EN)

放線菌類は医薬品と工業酵素の重要な生産者である。しかし,野生株株は工業的利用の前に面倒な開発を必要とする。ここでは,ランダム変異誘発,選択的圧力および単一細胞ソーティングに基づく,一般的に応用可能なレポーター誘導代謝工学ツールを示した。液体培養から直接変異集団から高形成個体細胞を再現性良く同定できる蛍光活性化細胞選別(FACS)法を開発した。ゲノムマイニングに基づく薬物発見は,標的代謝経路が実験室条件下でサイレントであるかもしれないという観察によって複雑な生物活性化合物の有望な供給源である。著者らは,Amycolatopsisにおけるサイレント変異キサンテン代謝経路の活性化による薬物発見のための著者らの技術を実証した。工業的菌株開発にこの方法を適用し,変異選択の第二ラウンドで9倍から99mg l ̄-1までの変異キサンテン収率を増加させた。放線菌類は異化酵素の重要な源であり,生成物収率は工業的生存率を決定する。工業用コレステロールオキシダーゼChoD生産者Streptomyces lavendulaeによる5倍収率改善を3ラウンドで20.4U g ̄-1に示した。菌株開発は,伝統的に生産培地最適化であり,それは,資源成分にハードを必要とする時間を要する多パラメータ問題である。超ハイスループットスクリーニングにより,培地最適化を回避でき,プレセット培養条件下で増殖した突然変異体ライブラリーから直接高いChoD収率生産株を同定した。要約すると,単一細胞フォーマットにおける数十百万の突然変異体をスクリーニングする能力は,サイレント代謝経路の活性化のための放線菌類の代謝工学のための広い適用性を提供し,蛋白質および天然物の収率を増加させる。【JST・京大機械翻訳】

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, , , , 【Automatic Indexing@JST】

遺伝子操作 , 微生物代謝産物の生産

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