RNAウイルスを用いたArabidopsisにおける高効率多重二重対立遺伝子遺伝性編集【JST・京大機械翻訳】

Nagalakshmi, U.; Meier, N.; Liu, J.-Y.; Voytas, D.; Dinesh-Kumar, S. P.

プレプリント

J-GLOBAL ID：202202218642745425 整理番号：22P0312944

RNAウイルスを用いたArabidopsisにおける高効率多重二重対立遺伝子遺伝性編集【JST・京大機械翻訳】

High efficiency multiplex biallelic heritable editing in Arabidopsis using an RNA virus

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発行年： 2022年01月22日プレプリントサーバーでの情報更新日： 2022年01月22日
JST資料番号： O7001B 資料種別：プレプリント
記事区分：プレプリント発行国：アメリカ合衆国 (USA) 言語：英語 (EN)

植物細胞へのCasヌクレアーゼおよび単一ガイドRNA(sgRNA)のような遺伝子編集成分のデリバリーは,一般にアグロバクテリウム媒介形質転換により達成される。Arabidopsisは形質転換が容易であるが,双対立遺伝子編集植物の発生は,その後の世代において多数の植物のスクリーニングを必要とする。ここでは,Arabidopsisで効率的な多重体細胞と二対立遺伝子遺伝性エディティングを誘導するtRNAIleuに融合したsgRNAの植物体デリバリーにおけるTobaccoラットウイルス(TRV)の最適化について述べた。tRNAIleuの封入体はTRVの全身運動を増強し,変異表現型は初期TRV::sgRNA-tRNAIleu感染Arabidopsisで見られ,致死表現型の解明を可能にした。突然変異体子孫は30~60%の範囲の頻度で次世代(M1)で回収され,次の(M2)世代で100%の突然変異体回復があった。ここで述べたTRV::tRNAIleuシステムは,単一世代におけるバイ対立遺伝子編集植物の生成を可能にし,大規模高スループットCRISPRスクリーンに受け入れられる。【JST・京大機械翻訳】

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遺伝子操作

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