内因性Fgf8a勾配のリアルタイムモニタリングはゼブラフィッシュ原腸形成時のモルフォゲンとしてその役割を試験する【JST・京大機械翻訳】

Harish, R. K.; Gupta, M.; Zoller, D.; Hartmann, H.; Gheisari, A.; Machate, A.; Hans, S.; Brand, M.

プレプリント

J-GLOBAL ID：202202220222585869 整理番号：22P0342876

内因性Fgf8a勾配のリアルタイムモニタリングはゼブラフィッシュ原腸形成時のモルフォゲンとしてその役割を試験する【JST・京大機械翻訳】

Real-time monitoring of endogenous Fgf8a gradient attests to its role as a morphogen during zebrafish gastrulation

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発行年： 2022年04月27日プレプリントサーバーでの情報更新日： 2022年04月27日
JST資料番号： O7001B 資料種別：プレプリント
記事区分：プレプリント発行国：アメリカ合衆国 (USA) 言語：英語 (EN)

モルフォゲン勾配は,均一な組織フィールドで細胞に対して位置情報を与える。高度に保存された成長因子であるFgf8aは,ゼブラフィッシュの原腸形成中のモルフォゲンとして作用すると提案されている。しかし,技術的限界は,これまで,内因性Fgf8a勾配の直接可視化とその形態形成活性の確認を妨げている。ここでは,内因性fgf8a遺伝子座でCRISPR/Cas9仲介EGFPノックアウトを用いて発生中の神経板におけるFgf8a伝播をモニターした。高感度イメージングプラットフォームを単一分子蛍光相関分光法(FCS)と組み合わせることにより,胚縁で産生されたFgf8aが細胞外空間を通して遊離拡散により伝播し,動物極に向かって傾斜分布を形成することを示した。Fgf8a勾配曲線をその下流標的の発現プロファイルに重ね合わせることは,Fgf8a仲介パターン形成の正確な入出力関係を決定する。Fgf8a入力の操作は,シグナル伝達結果を変化させ,それによってゼブラフィッシュ原腸形成中のbona fideモルフォゲンとしてFgf8aを確立する。さらに,Fgf8aの拡散律速バージョンを用いて,ソースからの蛋白質の細胞外拡散がその形態形成能を達成するために重要であることを示した。【JST・京大機械翻訳】

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発生と分化

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