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J-GLOBAL ID：202202220901513486   整理番号：22A0702985

エカリンメタロプロテイナーゼドメインの構造と機能の原核生物発現,評価および予測【JST・京大機械翻訳】

Prokaryotic expression, evaluation, and prediction of the structure and function of the ecarin metalloproteinase domain

著者 (6件)： Mohammadi Nasrin (Department of Biology, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran) ,  Bandehpour Mojgan (Cellular and Molecular Biology Research Center, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran) ,  Bandehpour Mojgan (Department of Biotechnology, School of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran) ,  Sotoodehnejadnematalahi Fattah (Department of Biology, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran) ,  Kazemi Bahram (Cellular and Molecular Biology Research Center, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran) ,  Kazemi Bahram (Department of Biotechnology, School of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran)
資料名： Proteins: Structure, Function, and Bioinformatics  (Proteins: Structure, Function, and Bioinformatics)
巻： 90  号： 3  ページ： 802-809  発行年： 2022年 
JST資料番号： T0761A  ISSN： 0887-3585  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： エクアリンは血液凝固実験において最も広く使われる薬剤化合物の一つであり,癌,肝臓,ループスおよび心血管疾患のような多くの疾患をモニターし,治療するために使用される。メタロプロテイナーゼドメインはエクアリンの活性部位として知られている。本研究では,エクリンメタロプロテイナーゼカセットを設計し,pUC57ベクター中で合成した。遺伝子断片を,pET-28aベクターに放出し,クローン化し,大腸菌で発現させた。組換蛋白質をウェスタンブロット法によって確認した。酵素活性は,実験室凝固試験によって推定し,プロトロンビン時間と三次構造は,反復読取装置(I-TASSER)サーバを使用して決定した。産生エクリン活性に対する血液凝固試験からのデータを独立t検定を用いて分析した。I-TASSERサーバ予測として,最高の信頼スコア0.95,テンプレートモデリングスコア(0.84±0.08),および二乗平均平方根偏差(3.5±2.4Å)を有するモデル1が最良のモデルとして考慮され,2e3xA酵素が標的蛋白質とより類似していた。予測結果は,エクリンメタロプロテイナーゼドメインの構造と機能の間の関係をより良く理解するのに役立った。また,原核生物発現系におけるこの活性部位の産生は,真核生物系の生産よりも簡単で,より費用対効果が高く,この組換えエクアリンはプロトロンビンをトロンビンに変換するので,Echisカルインatusの生ヘビ毒の代用物として使用でき,プロトロンビン時間試験を用いて推定したその活性は通常のエクアリンよりも速いことが分かった。Copyright 2022 Wiley Publishing Japan K.K. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 凝固 ,  大腸菌 ,  遺伝子 ,  血液凝固 ,  酵素活性度 ,  蛇毒 ,  トロンビン ,  プロトロンビン ,  活性部位 ,  真核生物 ,  ベクター ,  組換タンパク質 ,  *メタロプロテイナーゼ ,  ウェスタンブロット法 ,  プロトロンビン時間

著者キーワード (4件)： エカリン ,  I-TASSER ,  メタロプロテイナーゼドメイン ,  組換蛋白質

分類 (4件)： 線維素溶解・血液凝固  (EJ03040S) ,  血液検査  (GC02050D) ,  遺伝子発現  (EC02040Q) ,  血液・体液作用薬の基礎研究  (GW14010M)

タイトルに関連する用語 (3件)： 原核生物発現 ,  評価 ,  予測