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J-GLOBAL ID：202202276806147351   整理番号：22A1046417

異種移植のためのCRISPR/Cas3システムの研究【JST・京大機械翻訳】

Study of the CRISPR/Cas3 System for Xenotransplantation

著者 (15件)： Miyagawa Shuji (Department of Pediatric Surgery, Osaka University Graduate School of Medicine, Suita, Osaka, Japan) ,  Miyagawa Shuji (International Institute for Bio-Resource Research, Meiji University, Kawasaki, Japan) ,  Watanabe Masahito (International Institute for Bio-Resource Research, Meiji University, Kawasaki, Japan) ,  Nagashima Hiroshi (International Institute for Bio-Resource Research, Meiji University, Kawasaki, Japan) ,  Sato Kazuki (Department of Pediatric Surgery, Osaka University Graduate School of Medicine, Suita, Osaka, Japan) ,  Kogata Shuhei (Department of Pediatric Surgery, Osaka University Graduate School of Medicine, Suita, Osaka, Japan) ,  Toyama Chiyoshi (Department of Pediatric Surgery, Osaka University Graduate School of Medicine, Suita, Osaka, Japan) ,  Masahata Kazunori (Department of Pediatric Surgery, Osaka University Graduate School of Medicine, Suita, Osaka, Japan) ,  Kamiyama Masafumi (Department of Pediatric Surgery, Osaka University Graduate School of Medicine, Suita, Osaka, Japan) ,  Yamamoto Riho (Department of Pediatric Surgery, Osaka University Graduate School of Medicine, Suita, Osaka, Japan) ,  Eguchi Hiroshi (Department of Pediatric Surgery, Osaka University Graduate School of Medicine, Suita, Osaka, Japan) ,  Maeda Akira (Department of Pediatric Surgery, Osaka University Graduate School of Medicine, Suita, Osaka, Japan) ,  Yoshimi Kazuto (Institute of Medical Science, University of Tokyo, Tokyo, Japan) ,  Mashimo Tomoji (Institute of Medical Science, University of Tokyo, Tokyo, Japan) ,  Okuyama Hiroomi (Department of Pediatric Surgery, Osaka University Graduate School of Medicine, Suita, Osaka, Japan)
資料名： Transplantation Proceedings  (Transplantation Proceedings)
巻： 54  号： 2  ページ： 522-524  発行年： 2022年 
JST資料番号： C0846B  ISSN： 0041-1345  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： クラスIシステムで分類されたCRISPR/Cas3システムは,最近,新技術として注目されている。この系をブタ細胞に適用するために,bpNLS-Cascade,BPNLS-hCas3,およびpBS-U6icrRNAのプラスミドを調製した。最初に,2つのcrRNAを,#45および#86としてブタGal-T(GGTA1)のエキソン9において確立した。次に,hCas3+#45+#86(群1,対照群),Cascade+hCas3+#45(群2),Cascade+hCas3+#86(群3),およびCascade+hCas3+#45+#86(群4)を,ブタ線維芽細胞にセットし,トランスフェクションした。トランスフェクション細胞を,トランスフェクションの2日後にGSI-B4レクチンを用いて,蛍光活性化細胞選別(FACS)によるα1,3Galエピトープのバルク発現について分析した。その結果,発現の変化はG4>G2>G3の順で観察され,Cas3系の影響が示された。したがって,GGTA1の標的領域のネストポリメラーゼ連鎖反応(PCR)を行った。次に,各群からのPCR産物をブロッティングでチェックし,産物をTOPOベクターのクローニング座位に配置し,大腸菌に形質転換した。各群の16のコロニーをPCRによって検査し,わずかに変化する長さを有するPCR産物を含むクローンを評価した。これらのPCR変化の直接配列を294から754bp欠失として示した。結論として,ブタ細胞,特に異種移植におけるCRISPR/Cas3系の影響を確認した。Copyright 2022 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 大腸菌 ,  線維芽細胞 ,  レクチン ,  プラスミド ,  *異種移植 ,  コロニー ,  クローン ,  座位 ,  トランスフェクション ,  ベクター ,  エピトープ ,  ブロッティング ,  PCR法
準シソーラス用語： FACS ,  クローニング , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (1件)： 遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (3件)： 異種移植 ,  CRISPR ,  研究