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J-GLOBAL ID:202202290771429900   整理番号:22A1171390

Cytophaga hutchinsoniiにおいて発見された強力なプロモーターのいくつかの新しい特徴【JST・京大機械翻訳】

Some novel features of strong promoters discovered in Cytophaga hutchinsonii
著者 (6件):
資料名:
巻: 106  号:ページ: 2529-2540  発行年: 2022年 
JST資料番号: H0764A  ISSN: 0175-7598  CODEN: EJABDD  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: ドイツ (DEU)  言語: 英語 (EN)
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Cytophaga hutchinsoniiは,セルロースを効率的に分解できるBacteroides門に属する重要なグラム陰性細菌である。しかし,遺伝子転写の開始を仲介するプロモーターは長い間知られていない。本研究では,cDNA末端(5′RACE)の5′迅速増幅によりC.hutchinsoniiの転写開始部位(TSS)を決定した。プロモーター構造をTAATとTATTGとして初めて同定し,それぞれTSSの上流で-5と-31bp上流に位置した。-5および-31領域の機能およびプロモーターP_chu_1284のスペーサー長を,部位特異的リガーゼ非依存性変異誘発(SLIM)により調査した。結果は,TTGモチーフをグアニン(G)またはシトシン(C)に変異した時,プロモーター活性が急激に減少することを示した。興味あることに,強いプロモーターは,ある種のコピー内のプロモーター活性を増強できる多くのTTTGモチーフを伴うことを見出した。これらの特性はBacteriodes種の他のプロモーターと異なった。さらに,Perl6.0によるC.hutchinsoniiと他のBacteroides種のゲノム走査解析を行った。結果は,C.hutchinsoniiのプロモーター構造が他の種よりユニークな特徴を有することを示した。また,スクリーニングした誘導性プロモーターP_chu_2268を用いて,C.hutchinsoniiにおいて120kDaの分子量で蛋白質CHU_2196を過剰発現させた。本研究は,Bacteroidetes種のプロモーター構造を強化し,またin vivoで高度に発現した大きな蛋白質(セルラーゼ)の新しい方法を提供し,C.hutchinsoniiのユニークなセルロース分解機構の解明に役立った。C.hutchinsoniiの強いプロモーターの保存構造を明らかにし,プロモーターにおけるTTTGとAATTATGの2つの新規調節モチーフを発見し,in vivoでのセルラーゼの誘導発現のための新方法を確立し,C.hutchinsoniiのユニークなセルロース分解機構を説明した。Copyright The Author(s), under exclusive licence to Springer-Verlag GmbH Germany, part of Springer Nature 2022 Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
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微生物生理一般  ,  酵素一般 
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