マウス大腸蟯虫の検出方法

発明者： ,
出願人/特許権者：
代理人 (10件)：廣田雅紀 , 廣田鉄平 , 小澤誠次 , 東海裕作 , 堀内真 , 山内正子 , 園元修一 , 山村昭裕 , 富田博行 , 篠田真希恵
公報種別：公開公報
出願番号（国際出願番号）：特願2020-118717
公開番号（公開出願番号）：特開2022-015698
出願日： 2020年07月09日
公開日（公表日）： 2022年01月21日
要約：

【課題】比較的簡便にマウス由来の糞試料を調製でき、かつ、当該糞試料中に含まれるマウス大腸蟯虫由来のゲノムDNAを感度よく定量的に検出できる方法やキットを提供すること。【解決手段】マウスの糞からアルコール沈殿処理により糞試料を調製し、マウス大腸蟯虫リボソームDNA由来ITS-2領域のDNAを特異的に増幅するLNA含有プライマーセットと、当該領域のDNAに特異的にハイブリダイズし、蛍光物質及びクエンチャー物質で標識されたLNA含有プローブとを用いたPCRを行う。【選択図】なし

請求項（抜粋）：

以下の工程(a)~(c)を含むことを特徴とする、マウス大腸蟯虫の検出方法。 (a)被験マウスの糞を含む液を、ビーズ存在下でホモジナイズ処理した後、アルコール沈殿処理を行うことにより糞試料を調製する工程; (b)調製した糞試料と、以下のプライマーセット(i)及びプローブ(ii)とを用いてPCR(Polymerase Chain Reaction)を行う工程; (i)配列番号1に示されるヌクレオチド配列と少なくとも90%の同一性を有する、マウス大腸蟯虫のリボソームDNAにおけるITS-2(Internal Transcribed Spacer 2)領域のDNAを増幅可能なプライマーセットであって、1又は2以上のLNA(locked nucleic acid)を含むフォワードプライマーと、1又は2以上のLNAを含むリバースプライマーとからなる、前記プライマーセット (ii)前記プライマーセットにより増幅される、マウス大腸蟯虫のリボソームDNAにおけるITS-2領域のDNAにハイブリダイズするプローブであって、5’末端が蛍光物質で標識され、3’末端がクエンチャー物質で標識され、かつ、1又は2以上のLNAを含む、前記プローブ (c)蛍光物質由来の蛍光シグナルを検出する工程;

IPC (2件)：

C12Q 1/686 , C12Q 1/688

FI (2件)：

C12Q1/686 Z , C12Q1/6888 Z

Fターム (18件)：

4B063QA01 , 4B063QA13 , 4B063QA18 , 4B063QA19 , 4B063QQ03 , 4B063QQ28 , 4B063QQ42 , 4B063QQ52 , 4B063QR08 , 4B063QR32 , 4B063QR35 , 4B063QR55 , 4B063QR56 , 4B063QR62 , 4B063QS25 , 4B063QS32 , 4B063QS34 , 4B063QX02

引用特許：

出願人引用 (2件)

寄生虫卵の検出方法およびシステム
公報種別：公開公報出願番号：特願2010-145140 出願人：国立大学法人浜松医科大学
非特異的核酸増幅の抑制
公報種別：公表公報出願番号：特願2002-558539 出願人：アマシャムバイオサイエンスユーケイリミテッド

引用文献：

審査官引用 (7件)

Veterinary Parasitology, 2008, Vol.153, p.379-383
日本分子生物学会年会講演要旨集, 2019, Vol. 第42回, #2P-0671
腸内細菌学雑誌, 2006, Vol.20, p.259-262

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