特許
J-GLOBAL ID：202203019166251266
単一細胞の核酸配列分析
発明者：
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出願人/特許権者：
代理人 (6件)：
田中 伸一郎
, ▲吉▼田 和彦
, 山崎 一夫
, 市川 さつき
, 服部 博信
, 藤原 健史
公報種別：特許公報
出願番号（国際出願番号）：特願2018-529518
公開番号（公開出願番号）：特開2020-189846
特許番号：特許第7035128号
出願日： 2016年08月26日
公開日（公表日）： 2020年11月26日
請求項（抜粋）：
【請求項1】 以下の工程を含む、複数個の単一細胞小器官からcDNAシークエンシングライブラリーを調製する方法: 単一細胞小器官を空間的に分離する工程; 各単一細胞小器官からmRNA、ミクロRNA、小干渉RNA、リボソームRNA及び/又はミトコンドリアRNAを遊離させて、複数の個別RNAサンプルを提供する工程であって、各個別RNAサンプルのRNAが1つの単一細胞小器官に由来する工程; 各個別RNAサンプルのRNAから、cDNAの第一鎖を、タグを備える第一鎖合成プライマーにより合成し、それによって、当該タグを当該cDNAに取り込み、複数個のタグ付加cDNAサンプルを提供する工程であって、各タグ付加cDNAサンプルのcDNAが1つの単一細胞小器官に由来するRNAと相補性であり、さらに当該タグが細胞特異的識別子配列、及び固有分子識別子(UMI)配列を含む工程; 複数の単一細胞小器官由来のタグ付加cDNAサンプルをプールする工程; 当該プールしたcDNAサンプルを増幅させて、プールされたタグ付加二本鎖cDNAを生成する工程;及び 前記プールされたタグ付加cDNAを複数のトランスポソーム複合体と接触させることにより、プールされたタグ付加二本鎖cDNAサンプルに対してトランスポザーゼを用いたタグメンテーション反応を実施し、 各cDNAを同時に切断し、アダプターを各cDNA鎖に取り込み、それによって、複数の単一細胞小器官由来のcDNAライブラリーを生成する工程。
IPC (6件)：
C12N 15/10 ( 200 6.01)
, C12Q 1/6869 ( 201 8.01)
, C12Q 1/6844 ( 201 8.01)
, C12Q 1/686 ( 201 8.01)
, C12Q 1/6806 ( 201 8.01)
, C40B 40/06 ( 200 6.01)
C12N 15/10 110 Z
, C12Q 1/686 ZNA Z
, C12Q 1/684 Z
, C12Q 1/686 Z
, C12Q 1/680 Z
, C40B 40/06
