FRET検出方法および装置

Inventor： ,
Applicant, Patent owner：
Agent (2)：渡辺望稔 , 三和晴子
Gazette classification：公開公報
Application number (International application number)：2006065742
Publication number (International publication number)：2007240424
Application date： Mar. 10, 2006
Publication date： Sep. 20, 2007
Summary：

【課題】蛍光検出情報の不確定要素を除外して、定量的にFRETの発生の程度(例えばFRET効率)を測定することを可能とするFRET検出方法および装置を提供する。【解決手段】測定対象サンプルの蛍光のうち、ドナー分子が発するドナー蛍光成分の漏れ込み率と、アクセプタ分子が発するアクセプタ蛍光成分の漏れ込み率と、FRETが発生しない場合のドナー蛍光成分の非FRET蛍光寿命と、を少なくとも含む、予め記憶手段に記憶されているキャリブレーション情報を取得し、測定対象サンプルの蛍光の蛍光強度情報および位相情報と、ドナー蛍光成分の漏れ込み率およびアクセプタ蛍光成分の漏れ込み率とを用いて、ドナー蛍光成分のFRET蛍光寿命を求め、FRET効率を求める。【選択図】図8

Claim (excerpt)：

第1分子および第2分子で標識された測定対象サンプルにレーザ光を照射し、レーザ光によって励起された第1分子が発する蛍光が励起光として第2分子を励起し、この励起された第2分子が発する蛍光を含む、前記測定対象サンプルの蛍光を受光することによって、第1分子のエネルギーが第2分子に移動するFRET(Fluorescence Resonance Energy Transfer)を検出するFRET検出方法であって、レーザ光の強度を所定の周波数で時間変調して前記測定対象サンプルについて照射し、このときの前記測定対象サンプルの蛍光を受光波長帯域の異なる複数の検出センサで受光することにより、前記測定対象サンプルの蛍光の蛍光強度情報および位相情報を含む検出値を収集するステップと、前記測定対象サンプルの前記蛍光のうち前記第1分子が発する第1分子蛍光成分の、複数の前記受光波長帯域それぞれの蛍光強度の比を表す第1分子蛍光漏れ込み率、および前記第1分子蛍光成分の位相情報と、前記蛍光のうち前記第2分子が発する第2分子蛍光成分の、複数の前記受光波長帯域それぞれの蛍光強度の比を表す第2分子蛍光漏れ込み率、および前記第2分子蛍光成分の位相情報と、レーザ光によって励起された第1分子が発する蛍光が1次遅れ系の緩和応答であるとしたときの、前記FRETが発生しない場合の前記第1分子蛍光成分の非FRET蛍光寿命と、を少なくとも含む、予め記憶手段に記憶されているキャリブレーション情報を取得するステップと、各検出センサから収集された前記検出値から、複数の前記受光波長帯域それぞれの、前記測定対象サンプルの蛍光の蛍光強度情報および位相情報を求めて、求めた前記蛍光強度情報および前記位相情報と、前記第1分子蛍光漏れ込み率および前記第1分子蛍光成分の前記位相情報と、前記第2分子蛍光漏れ込み率および前記第2分子蛍光成分の前記位相情報と、を用いて、レーザ光によって励起された第1分子が発する蛍光が1次遅れ系の緩和応答であるとしたときの、前記第1分子蛍光成分のFRET蛍光寿命を求めるステップと、前記第1分子蛍光成分のFRET蛍光寿命と、前記第1分子蛍光成分の前記非FRET蛍光寿命との比を用いて表されるFRET発生情報を求めるステップと、を有することを特徴とするFRET検出方法。

IPC (1)：

G01N 21/64

FI (2)：

G01N21/64 B , G01N21/64 F

F-Term (19)：

2G043BA16 , 2G043CA04 , 2G043DA01 , 2G043DA05 , 2G043EA01 , 2G043FA03 , 2G043GA25 , 2G043GB28 , 2G043HA01 , 2G043HA09 , 2G043JA02 , 2G043KA02 , 2G043KA05 , 2G043KA09 , 2G043LA01 , 2G043LA02 , 2G043NA01 , 2G043NA06 , 2G043NA13

Patent cited by the Patent：

Cited by applicant (6)

蛍光分光分析の方法
Gazette classification：公開公報 Application number：特願2004-013317 Applicant：オリンパス株式会社
POSH核酸、ポリペプチド及び関連する方法、関連する用途
Gazette classification：公表公報 Application number：特願2004-503917 Applicant：プロテオロジックス,インク.
細胞成分に対する変化を検出する方法
Gazette classification：公表公報 Application number：特願2000-595150 Applicant：インペリアルキャンサーリサーチテクノロジーリミテッド

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