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J-GLOBAL ID:200903038572923099

蛍光強度消光効果を用いる溶液中のヌクレオチドのアッセイ

Inventor:
Applicant, Patent owner:
Agent (1): 社本 一夫 (外5名)
Gazette classification:公表公報
Application number (International application number):2000501276
Publication number (International publication number):2001510681
Application date: Jun. 30, 1998
Publication date: Aug. 07, 2001
Summary:
【要約】本発明は、アンチセンスプローブ、例えばPNAプローブのレーザー誘起性蛍光を用いて、液体媒体中のヌクレオチドを迅速に、経済的に、かつ効率よく配列決定および分析する方法を提供する。得られた媒体の蛍光強度は、標的配列に対するプローブのハイブリダイゼーション効率に反比例する。該方法は、ハイブリダイズしていないプローブおよびハイブリダイゼーション複合体を検出の前に分離することを要しない点において特に有益である。該方法を用いて、折り畳まれたヌクレオチド配列中のアクセス可能な領域を同定し、ハイブリダイゼーション複合体中のミスマッチの塩基対の数を決定し、ゲノムをマッピングすることができる。
Claim (excerpt):
液体媒体中の少なくとも1つの一本鎖または二本鎖ヌクレオチド配列を検出する方法であって、前記少なくとも1つのヌクレオチド配列を含む前記液体媒体を用意し;前記液体媒体に少なくとも1つのアンチセンスプローブを加えて、前記少なくとも1つのヌクレオチド配列を有する少なくとも1つのハイブリダイゼーション複合体を形成し、ここで前記少なくとも1つのプローブは少なくとも1つのマーカーを含み;そして前記液体媒体中の前記少なくとも1つのハイブリダイゼーション複合体の量に反比例し、前記液体媒体のハイブリダイズしていない前記少なくとも1つのプローブの量に比例する少なくとも1つのシグナルを検出することにより、前記少なくとも1つのヌクレオチド配列を検出するの各工程を含み、前記方法は、前記シグナル検出の前に前記少なくとも1つのハイブリダイゼーション複合体からハイブリダイズしていないプローブを分離することなく、かつ前記少なくとも1つのプローブまたは前記少なくとも1つのヌクレオチド配列にシグナル消光剤を提供することなく実施されることを特徴とする方法。
IPC (2):
C12Q 1/68 ,  C12N 15/09
FI (2):
C12Q 1/68 A ,  C12N 15/00 A
Patent cited by the Patent:
Cited by examiner (4)
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Article cited by the Patent:
Cited by examiner (5)
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