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J-GLOBAL ID：201403081303276721
1α,25,26-トリヒドロキシビタミンDの製造方法
Inventor：
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Applicant, Patent owner：
Agent (1)：
特許業務法人特許事務所サイクス
Gazette classification：特許公報
Application number (International application number)：2009144232
Publication number (International publication number)：2011000018
Patent number：5517118
Application date： Jun. 17, 2009
Publication date： Jan. 06, 2011
Claim (excerpt)：
【請求項1】ビタミンD及びビタミンD水酸化体からなる群から選ばれる少なくとも1種の化合物を含む基質溶液に、下記(a)〜(b)のいずれか1種のアミノ酸配列を有し、かつ下記(d)の活性を有するビタミンD水酸化酵素を作用させて、1α,25,26-トリヒドロキシビタミンDを主成分として含む1α,25,26-トリヒドロキシビタミンD分離物を得ることを特徴とする、1α,25,26-トリヒドロキシビタミンDの製造方法。
(a)配列表の配列番号1に記載のアミノ酸配列において、
73位のアルギニンがアラニン、バリン又はロイシンに、及び84位のアルギニンがアラニン、バリン、ロイシン、フェニルアラニン、又はグルタミンに置換された、改変アミノ酸配列
(b)前記改変アミノ酸配列において、前記73位のアルギニン及び84位のアルギニンの置換の他さらに、1から9個のアミノ酸の欠失、置換、逆位、付加及び挿入からなる群から選ばれる少なくとも1種の修飾を有するアミノ酸配列
(d)0.2μM ビタミンD水酸化酵素を、0.1mg/ml フェレドキシン、0.1U/ml フェレドキシン還元酵素、1U/ml グルコース脱水素酵素、1% グルコース、0.1mg/ml カタラーゼ及び1mM NADPHを含む100mM Tris-HCl(pH7.4)-1mM EDTA緩衝液中の10μM 1,25-ジヒドロキシビタミンD3に、30°C、30分間作用させた場合の1α,25,26-トリヒドロキシビタミンD3への変換率は0.1%以上である
IPC (2)：
C12P 7/02 ( 200 6.01)
, C12N 15/09 ( 200 6.01)
C12P 7/02 ZNA
, C12N 15/00 A
