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J-GLOBAL ID:201803006066631838

牛乳房炎原因微生物を検出する方法、それに使用されるプライマーセットおよびアッセイキット

Inventor:
Applicant, Patent owner:
Agent (1): 特許業務法人スズエ国際特許事務所
Gazette classification:特許公報
Application number (International application number):2013241167
Publication number (International publication number):2015100282
Patent number:6292659
Application date: Nov. 21, 2013
Publication date: Jun. 04, 2015
Claim (excerpt):
【請求項1】(1)(i)配列番号1、配列番号2、配列番号3、配列番号4および配列番号5によりそれぞれに示されるポリヌクレオチドをそれぞれに含むプライマーからなる、Staphylococcus属の微生物を検出するための第1のプライマーセット、 (ii)配列番号30、配列番号31、配列番号32、配列番号33および配列番号34によりそれぞれに示されるポリヌクレオチドをそれぞれに含むプライマーからなる、Enterococcus属の微生物を検出するための第2のプライマーセット、 (iii)配列番号46、配列番号47、配列番号48、配列番号49、配列番号50および配列番号51によりそれぞれに示されるポリヌクレオチドをそれぞれに含むプライマーからなる、Streptococcus属の微生物を検出するための第3のプライマーセット、 (iv)配列番号65、配列番号66、配列番号67、配列番号68および配列番号69によりそれぞれに示されるポリヌクレオチドをそれぞれに含むプライマーからなる、S. agalactiaeを検出するための第4のプライマーセット、 (v)配列番号80、配列番号81、配列番号82、配列番号83および配列番号84によりそれぞれに示されるポリヌクレオチドをそれぞれに含むプライマーからなる、S. uberisを検出するための第5のプライマーセット、 (vi)配列番号127、配列番号128、配列番号129、配列番号130および配列番号132によりそれぞれに示されるポリヌクレオチドをそれぞれに含むプライマーからなる、Enterobacteria科の微生物を検出するための第6のプライマーセット、 (vii)配列番号149、配列番号150、配列番号151、配列番号152、配列番号153および配列番号154によりそれぞれに示されるポリヌクレオチドをそれぞれに含むプライマーからなる、E.coliを検出するための第7のプライマーセット、 (viii)配列番号163、配列番号164、配列番号165、配列番号166、配列番号167および配列番号168によりそれぞれに示されるポリヌクレオチドをそれぞれに含むプライマーからなる、Klebsiellaを検出するための第8のプライマーセット (ix)配列番号225、配列番号226、配列番号227、配列番号228および配列番号229によりそれぞれに示されるポリヌクレオチドをそれぞれに含むプライマーからなる、Corynebacterium bovisを検出するための第9のプライマーセット、 (x)配列番号230、配列番号231、配列番号232、配列番号233および配列番号234によりそれぞれに示されるポリヌクレオチドをそれぞれに含むプライマーからなる、Corynebacterium pyogenesを検出するための第10のプライマーセット、 (xi)配列番号256、配列番号257、配列番号258、配列番号259、配列番号260、配列番号261、配列番号262、配列番号263、配列番号264および配列番号265によりそれぞれに示されるポリヌクレオチドをそれぞれに含むプライマーからなる、Mycoplasma属の微生物を検出するための第11のプライマーセット、 (xii)配列番号304、配列番号305、配列番号306、配列番号307、配列番号308および配列番号309によりそれぞれに示されるポリヌクレオチドをそれぞれに含むプライマーからなる、アルギニン分解性Mycoplasmaを検出するための第12のプライマーセット、並びに (xiii)配列番号318、配列番号319、配列番号320、配列番号321および配列番号322によりそれぞれに示されるポリヌクレオチドをそれぞれに含むプライマーからなる、Prototheca zopfiiを検出するための第13のプライマーセット、 を含むLAMP増幅用プライマーセットを用いて、試料中の核酸をLAMP法により増幅することと、 (2)(1)の全てのプライマーセットにより得られた増幅産物を含む増幅産物混合物を、配列番号6、配列番号9および配列番号15(Staphylococcus属の微生物検出用)、配列番号92、配列番号95(Enterococcus属の微生物検出用)、配列番号99および配列番号101(Streptococcus属の微生物検出用)、配列番号106(S. agalactiae検出用)、配列番号110(S. uberis検出用)、配列番号170(Enterobacteria科の微生物検出用)、配列番号175(Klebsiella検出用)、配列番号180(E.coli検出用)、配列番号252(Corynebacterium bovis検出用)、配列番号254(Corynebacterium pyogenes検出用)、配列番号310および配列番号311(Mycoplasma属の微生物検出用)、配列番号314(アルギニン分解性Mycoplasma検出用)並びに配列番号333(Prototheca zopfii検出用)によりそれぞれに示されるポリヌクレオチドをそれぞれに含む核酸プローブを含む核酸プローブセットと反応させることと、 (3)(2)の反応後に得られたハイブリダイズ信号の有無および/または大きさに基づいて、前記試料に含まれる牛乳房炎原因微生物の有無および/または量を判定することと、 を含む牛乳房炎原因微生物を検出する方法。
IPC (2):
C12N 15/09 ( 200 6.01) ,  C12Q 1/68 ( 201 8.01)
FI (2):
C12N 15/00 ZNA A ,  C12Q 1/68 A
Patent cited by the Patent:
Cited by applicant (1) Cited by examiner (1)

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