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J-GLOBAL ID：201803006883938821

標的核酸の定量方法及びそのためのキット

Inventor： 星野 辰彦 ,  稲垣 史生
Applicant, Patent owner： 国立研究開発法人海洋研究開発機構
Agent (1)： 森本 敏明
Gazette classification：特許公報
Application number (International application number)：2017540803
Patent number：6284137
Application date： Nov. 17, 2016
Claim (excerpt)：

【請求項1】下記工程(1)〜(4)を含む、標的核酸の定量方法。 (1)標的核酸の3’末端側から5’末端側への方向に第1の配列、対象配列及び第2の配列を含む一本鎖の核酸又は二本鎖核酸から得られる該一本鎖の核酸を鋳型として、5’末端側から3’末端側への方向に特定配列、ランダム配列及び第1の配列に相補的な配列を含み、かつ、ランダム配列の種類の数に応じて複数種類の第1のプライマーを用いて、アニーリング反応、核酸伸長反応及びヌクレアーゼ反応を実施することにより、一方の一本鎖が5’末端側から3’末端側への方向に特定配列、ランダム配列、第1の配列に相補的な配列、対象配列に相補的な配列及び第2の配列に相補的な配列を含む第1の二本鎖核酸を得る工程 (2)工程(1)で得られた第1の二本鎖核酸を鋳型として、第2の配列を含む第2のプライマー及び特定配列を含む第3のプライマーを用いて、PCRを実施して、第2の二本鎖核酸を得る工程 (3)工程(2)で得られた第2の二本鎖核酸の配列を決定する工程 (4)工程(3)で決定された配列に基づいて、対象配列及びランダム配列の組み合わせの数を測定することにより、下記数式(1) (1) (式中、Nは標的核酸の数を表わし;Cはランダム配列の種類の数を表わし;及び、Hは測定された対象配列及びランダム配列の組み合わせの数を表わす) により、標的核酸を定量する工程

IPC (2)：

C12Q 1/68 ( 201 8.01) ,  C12N 15/09 ( 200 6.01)

FI (2)：

C12Q 1/68 ZNA A ,  C12N 15/00 A