分割型ルシフェラーゼ及びそれを用いたビタミンD受容体リガンドの高感度検出法

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Applicant, Patent owner：
Agent (1)：特許業務法人特許事務所サイクス
Gazette classification：再公表公報
Application number (International application number)：JP2018040583
Publication number (International publication number)：WO2019088200
Application date： Oct. 31, 2018
Publication date： May. 09, 2019
Summary：

本発明は、下記(1)〜(3)のいずれかの融合タンパク質に関する。(1)ルシフェラーゼのN端ドメイン(LucN)、ビタミンD受容体(VDR)のビタミンD結合ドメインを少なくとも1個、及びルシフェラーゼのC端ドメイン(LucC)を順不同に含む融合タンパク質であって、LX1X2LL配列、及びリンカー配列の一方又は両方をさらに順不同に含むことができる融合タンパク質、(2)LucN又はLucC、及びLX1X2LL配列を順不同に含む融合タンパク質であって、リンカー配列をさらに順不同に含むことができる融合タンパク質、(3)VDRのビタミンD結合ドメインを少なくとも1個、及びLucC又はLucNを順不同に含む融合タンパク質であって、リンカー配列をさらに順不同に含むことができる融合タンパク質。上記融合タンパク質を用いる、VDRに結合性を示す物質のスクリーニング方法。本発明は、アゴニストが結合すると発光が増大するようなバイオセンサーの提供、及びビタミンD受容体(VDR)に強く結合する物質を簡便にスクリーニングできる方法を提供する。

Claim (excerpt)：

下記(1)〜(3)のいずれかの融合タンパク質。 (1)ルシフェラーゼのN端ドメイン(以下、LucNと表記する)、ビタミンD受容体(以下、VDRと表記する)のビタミンD結合ドメインを少なくとも1個、及びルシフェラーゼのC端ドメイン(以下、LucCと表記する)を順不同に含む融合タンパク質であって、 LX1X2LL配列(X1は、M、W、T、S、E、V、R、Q、K、L又はHであり、X2は、N、T、S、G、E、R、Q、Y又はKである)、及びリンカー配列の一方又は両方をさらに順不同に含む融合タンパク質、 (2)LucN又はLucC、及び LX1X2LL配列(X1は、M、W、T、S、E、V、R、Q、K、L又はHであり、X2は、N、T、S、G、E、R、Q、Y又はKである)を順不同に含む融合タンパク質であって、リンカー配列をさらに順不同に含むことができる融合タンパク質、 (3)VDRのビタミンD結合ドメインを少なくとも1個、及び LucC又はLucNを順不同に含む融合タンパク質であって、リンカー配列をさらに順不同に含むことができる融合タンパク質。

IPC (9)：

C12N 15/62 , C12N 15/53 , C12N 15/12 , C12N 15/63 , C12N 5/10 , C07K 19/00 , C12N 9/02 , C07K 14/705 , C12Q 1/66

FI (9)：

C12N15/62 Z , C12N15/53 , C12N15/12 , C12N15/63 Z , C12N5/10 , C07K19/00 , C12N9/02 , C07K14/705 , C12Q1/66

F-Term (48)：

4B050CC03 , 4B050CC05 , 4B050DD11 , 4B050KK18 , 4B050LL03 , 4B063QA01 , 4B063QA18 , 4B063QR02 , 4B063QR48 , 4B063QS02 , 4B063QS32 , 4B063QX01 , 4B063QX02 , 4B065AA01X , 4B065AA26X , 4B065AA57X , 4B065AA83X , 4B065AA86X , 4B065AA87X , 4B065AA87Y , 4B065AA90X , 4B065AA90Y , 4B065AA93X , 4B065AA93Y , 4B065AB01 , 4B065AC14 , 4B065BA01 , 4B065BA02 , 4B065CA24 , 4B065CA28 , 4B065CA46 , 4H045AA10 , 4H045AA20 , 4H045AA30 , 4H045BA10 , 4H045BA11 , 4H045BA12 , 4H045BA13 , 4H045BA14 , 4H045BA15 , 4H045BA16 , 4H045BA17 , 4H045BA41 , 4H045CA40 , 4H045DA50 , 4H045DA89 , 4H045EA50 , 4H045FA74

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