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J-GLOBAL ID：201702225932433635   整理番号：17A0318176

Escherichia coliにおけるナットウキナーゼの発現とその包接体の再生【Powered by NICT】

Expression of nattokinase in Escherichia coli and renaturation of its inclusion body

著者 (7件)： Ni He (Guangdong Provincial Key Lab of Biotechnology for Plant Development, College of Life Sciences, and Research and Development Center for Rare Animals, South China Normal University, Guangzhou 510631, China) ,  Guo Peng-Cheng (Guangdong Provincial Key Lab of Biotechnology for Plant Development, College of Life Sciences, and Research and Development Center for Rare Animals, South China Normal University, Guangzhou 510631, China) ,  Jiang Wei-Ling (Guangdong Provincial Key Lab of Biotechnology for Plant Development, College of Life Sciences, and Research and Development Center for Rare Animals, South China Normal University, Guangzhou 510631, China) ,  Fan Xiao-Min (Guangdong Provincial Key Lab of Biotechnology for Plant Development, College of Life Sciences, and Research and Development Center for Rare Animals, South China Normal University, Guangzhou 510631, China) ,  Luo Xiang-Yu (Guangdong Provincial Key Lab of Biotechnology for Plant Development, College of Life Sciences, and Research and Development Center for Rare Animals, South China Normal University, Guangzhou 510631, China) ,  Luo Xiang-Yu (Guangzhou Huichuan Medical Technology Ltd., 211 Jinfu Building, 90 Qifu Road, Baiyun District, Guangzhou 510410, China) ,  Li Hai-Hang (Guangdong Provincial Key Lab of Biotechnology for Plant Development, College of Life Sciences, and Research and Development Center for Rare Animals, South China Normal University, Guangzhou 510631, China)
資料名： Journal of Biotechnology  (Journal of Biotechnology)
巻： 231  ページ： 65-71  発行年： 2016年 
JST資料番号： A0456C  ISSN： 0168-1656  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： ナットウキナーゼは心血管疾患の治療適用を伴う重要な線維素溶解酵素である。全長/成熟ナットウキナーゼ遺伝子はBacillus subtilis var.nattoからクローン化し,大腸菌でpQE30ベクターで発現させた。全長遺伝子は細胞内可溶性と培地画分における低ナットウキナーゼ活性を発現した。成熟遺伝子は酵素活性のない封入体における低可溶性ナットウキナーゼ活性と大量の不溶性蛋白質を発現した。種々のpH値で大量リフォールディング溶液(RS)をスクリーニングし,pH=9でRS,RS-11はナットウキナーゼ封入体を再折畳みに選択した。組換細胞は0.1mg/mlリゾチームと超音波処理で溶解した。遠心分離後,pelleteは1%TritonX-100を含む20mMのTris-HCl緩衝液(pH 7.5)で2回洗い封入体を精製した。封入体はpH=12.0で水に溶解し,RSで再折畳みした。再折畳み蛋白質は等しい体積RSで従来の希釈法(RS Xへの20倍希釈)及び蛋白質溶液の直接混合による42.8IU/mgと79.3IU/mg線維素溶解活性を示し,それぞれ,B.subtilis var.nattoからの全水溶性蛋白質の52.0IU/mgと比較した。本研究では,E.coliで発現した組換ナットウキナーゼの封入体は,蛋白質溶液を混合し等しい体積再折畳み溶液で直接天然酵素活性レベルに再折畳み簡単にできることを示した。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】

シソーラス用語： ベクター ,  塩酸 ,  不溶性 ,  リゾチーム ,  可溶性 ,  希釈 ,  タンパク質 ,  枯草菌 ,  酵素活性度 ,  線維素溶解 ,  クローン ,  *封入体 ,  プラスミン ,  折畳み ,  溶解性
準シソーラス用語： *ナットウキナーゼ , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： ナットウキナーゼ ,  原核生物発現 ,  封入体 ,  再生

分類 (1件)： 生物学的機能  (EB03040U)

タイトルに関連する用語 (3件)： Escherichia ,  ナットウキナーゼ ,  発現