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J-GLOBAL ID:201502214898748723   整理番号:15A0903363

NMRによる内因的に無秩序な蛋白質領域の系統的評価方法

A Method for Systematic Assessment of Intrinsically Disordered Protein Regions by NMR
著者 (11件):
資料名:
巻: 16  号:ページ: 15743-15760 (WEB ONLY)  発行年: 2015年07月 
JST資料番号: U7038A  ISSN: 1422-0067  CODEN: IJMCFK  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: スイス (CHE)  言語: 英語 (EN)
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安定な構造を欠き高度に柔軟な内因的に無秩序な蛋白質(IDPs)は生物学者の注目を集める。それ故,溶液中で非構造なポリペプチド領域を同定するための系統的方法の開発は重要である。核磁気共鳴(NMR)を使ったIDPsの物理化学的特性を評価するための”間接的/反射”検出系を設計した。この手法は,熱安定性膜蛋白質PH0471を使った”キメラ膜蛋白質”ベースの方法を採用した。この蛋白質は柔軟なリンカで連結したふたつのドメイン,膜貫通螺旋領域及びC末端OB(オリゴヌクレオチド/オリゴサッカリド結合)折畳みドメイン(NfeDCドメインと命名)を含有した。界面活性剤可溶化PH0471のOB折畳みドメインのNMR信号は,リンカ領域の柔軟のおかげで観察された。本研究において,リンカ領域を標的IDPsで置き換えた。予測ツールPOODLEを使って,53の候補を選び,35発現ベクターを構築した。続いて,リンカとして,25IDPsを持つ15N標識キメラPH0471蛋白質を得た。NMRスペクトルからIDPsを3つのカテゴリーに分類した:柔軟,中程度に柔軟及び非柔軟。非柔軟なIDPsは膜関連又は凝集傾向配列を含有した。これはIDPsの評価のために間接/反射NMR法を使い,計算ツール由来の予測を検証できる初めての試みである。(翻訳著者抄録)
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分類 (2件):
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分子構造  ,  有機化合物のNMR 
タイトルに関連する用語 (4件):
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