特許
J-GLOBAL ID:201603011659970468

Cas9ヌクレアーゼによる卵母細胞における遺伝子編集

発明者:
出願人/特許権者:
代理人 (1件): 細田 芳徳
公報種別:公表公報
出願番号(国際出願番号):特願2015-558501
公開番号(公開出願番号):特表2016-507244
出願日: 2014年02月27日
公開日(公表日): 2016年03月10日
要約:
本発明は、ゲノム中に改変された標的配列を保有する非ヒト哺乳動物卵母細胞を作製する方法であって、該方法が、非ヒト哺乳動物卵母細胞に、(a)クラスター化され、規則的に間を開けられた短いパリンドロームリピート(CRISPR)関連タンパク質9(Cas9タンパク質)または前記Cas9タンパク質をコードする核酸分子;ならびに(b-i)標的配列特異的CRISPR RNA (crRNA)およびトランス活性化crRNA (tracr RNA)もしくは前記RNAをコードする核酸分子;または(b-ii)標的配列特異的crRNAおよびtracrRNAを含むキメラRNA配列もしくは前記RNAをコードする核酸分子を導入する工程を含み、ここで、(a)で導入されるCas9タンパク質および(b-i)または(b-ii)で導入されるRNA配列(1つまたは複数)が、標的配列に特異的に結合し、かつ標的配列中に一本鎖または二本鎖の切断を導入するタンパク質/RNA複合体を形成する、方法に関する。本発明はさらに、標的配列が、ドナー核酸配列を用いて、相同組み換えにより改変され、該方法が、(c)核酸分子を細胞に導入する工程をさらに含み、該核酸分子が、ドナー核酸配列および標的配列に相同な領域を含む、発明の方法に関する。本発明はまた、ゲノム中に改変された標的配列を保有する非ヒト哺乳動物を作製する方法に関する。
請求項(抜粋):
ゲノム中に改変された標的配列を保有する非ヒト哺乳動物卵母細胞を作製する方法であって、該方法が、非ヒト哺乳動物卵母細胞に (a) クラスター化され、規則的に間を開けられた短いパリンドロームリピート(CRISPR)関連タンパク質9(Cas9タンパク質)または前記Cas9をコードする核酸分子;ならびに (b-i) 標的配列特異的CRISPR RNA (crRNA)およびトランス活性化crRNA (tracr RNA)もしくは前記RNAをコードする核酸分子;または (b-ii) 標的配列特異的crRNAおよびtracrRNAを含むキメラRNA配列もしくは前記RNAをコードする核酸分子 を導入する工程を含み、 ここで、(a)において導入される該Cas9タンパク質および(b-i)または(b-ii)において導入されるRNA配列(1つまたは複数)は、標的配列に特異的に結合し、かつ標的配列中に一本鎖または二本鎖の切断(break)を導入するタンパク質/RNA複合体を形成する、方法。
IPC (2件):
C12N 15/09 ,  A01K 67/027
FI (2件):
C12N15/00 A ,  A01K67/027
Fターム (6件):
4B024AA20 ,  4B024CA05 ,  4B024DA02 ,  4B024EA04 ,  4B024FA02 ,  4B024GA12
引用特許:
審査官引用 (2件)
引用文献:
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