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J-GLOBAL ID：201802235561898913   整理番号：18A1649434

ビタミンD受容体リガンドの評価のための新規分割ルシフェラーゼに基づくバイオセンサおよび生細胞におけるCYP27B1活性の推定への応用【JST・京大機械翻訳】

Novel split luciferase-based biosensors for evaluation of vitamin D receptor ligands and their application to estimate CYP27B1 activity in living cells

著者 (3件)： Mano Hiroki (Department of Pharmaceutical Engineering, Faculty of Engineering, Toyama Prefectural University, 5180 Kurokawa, Imizu, Toyama 939-0398, Japan) ,  Ikushiro Shinichi (Department of Biotechnology, Faculty of Engineering, Toyama Prefectural University, 5180 Kurokawa, Imizu, Toyama 939-0398, Japan) ,  Sakaki Toshiyuki (Department of Pharmaceutical Engineering, Faculty of Engineering, Toyama Prefectural University, 5180 Kurokawa, Imizu, Toyama 939-0398, Japan)
資料名： Journal of Steroid Biochemistry & Molecular Biology  (Journal of Steroid Biochemistry & Molecular Biology)
巻： 183  ページ： 221-227  発行年： 2018年 
JST資料番号： C0595A  ISSN： 0960-0760  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： イギリス (GBR)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 最近,VDRのリガンド結合ドメイン(LBD)を有するホタルルシフェラーゼのキメラ融合蛋白質であるLucN-LBD-LucCバイオセンサと呼ばれる分割ルシフェラーゼ法を用いて,in vivo及びin vitroでビタミンD受容体(VDR)リガンドの新規検出システムを成功裏に作成した。この系において,LucN-LBD-LucCバイオセンサのルシフェラーゼ光強度はVDRリガンドの結合により減少した。この系は短時間でVDRリガンドの評価に非常に有用であるが,LucN-LBD-LucCバイオセンサの感度は十分ではない。本研究において,ステロイド受容体コアクチベータ-1(SRC-1),転写中間因子2(TIF2),及びビタミンD受容体相互作用蛋白質205(DRIP205)のようなLBDとコアクチベータ間の相互作用に関与するLXXLLモチーフペプチドを,LucN-LBD-LucCバイオセンサのLucNとLBDの間に挿入した。驚くべきことに,得られたLucN-LXXL-LBD-LucCバイオセンサは天然VDRリガンドに応答して光強度を増加させた。この高感度バイオセンサ系は,変異体VDRに対する高親和性リガンドの発見のための強力なツールとなる可能性がある。さらに,90分以内に生細胞においてLucN-LXXL-LBD-LucCバイオセンサを用いて野生型及び変異体CYP27B1の活性を成功裏に推定した。Copyright 2018 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *センサ ,  *バイオセンサ ,  *ビタミンD ,  高感度 ,  *ビタミンD受容体 ,  *ルシフェラーゼ ,  融合タンパク質 ,  相互作用 ,  親和性 ,  野生型 ,  キメラ ,  ペプチド ,  in vitro実験
準シソーラス用語： コアクチベータ ,  *生細胞 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： ビタミンD ,  ビタミンD受容体 ,  CYP27B1 ,  生物発光センサ ,  スプリットルシフェラーゼ

分類 (2件)： ビタミンD  (EB07050H) ,  遺伝子発現  (EC02040Q)

タイトルに関連する用語 (10件)： ビタミンD受容体 ,  リガンド ,  評価 ,  ルシフェラーゼ ,  バイオセンサ ,  生細胞 ,  CYP27B1 ,  活性 ,  推定 ,  応用