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J-GLOBAL ID：201902217723404415   整理番号：19A1815262

マルチビーム走査Electron顕微鏡による大面積蛍光およびElectron顕微鏡相関イメージング【JST・京大機械翻訳】

Large-Area Fluorescence and Electron Microscopic Correlative Imaging With Multibeam Scanning Electron Microscopy

著者 (20件)： Shibata Shinsuke (Electron Microscope Laboratory, Keio University School of Medicine, Tokyo, Japan) ,  Shibata Shinsuke (Department of Physiology, Keio University School of Medicine, Tokyo, Japan) ,  Iseda Taro (Electron Microscope Laboratory, Keio University School of Medicine, Tokyo, Japan) ,  Iseda Taro (Department of Physiology, Keio University School of Medicine, Tokyo, Japan) ,  Mitsuhashi Takayuki (Department of Pediatrics, Keio University School of Medicine, Tokyo, Japan) ,  Oka Atsushi (Department of Physiology, Keio University School of Medicine, Tokyo, Japan) ,  Shindo Tomoko (Electron Microscope Laboratory, Keio University School of Medicine, Tokyo, Japan) ,  Shindo Tomoko (Department of Physiology, Keio University School of Medicine, Tokyo, Japan) ,  Moritoki Nobuko (Electron Microscope Laboratory, Keio University School of Medicine, Tokyo, Japan) ,  Nagai Toshihiro (Electron Microscope Laboratory, Keio University School of Medicine, Tokyo, Japan) ,  Otsubo Shinya (Department of Physiology, Keio University School of Medicine, Tokyo, Japan) ,  Inoue Takashi (Central Institute for Experimental Animals, Kawasaki, Japan) ,  Sasaki Erika (Central Institute for Experimental Animals, Kawasaki, Japan) ,  Akazawa Chihiro (Department of Biochemistry and Biophysics, Graduate School of Health Care Sciences, Tokyo Medical and Dental University, Tokyo, Japan) ,  Takahashi Takao (Department of Pediatrics, Keio University School of Medicine, Tokyo, Japan) ,  Schalek Richard (Department of Molecular and Cellular Biology, Harvard University, Cambridge, MA, United States) ,  Lichtman Jeff W. (Department of Molecular and Cellular Biology, Harvard University, Cambridge, MA, United States) ,  Okano Hideyuki (Electron Microscope Laboratory, Keio University School of Medicine, Tokyo, Japan) ,  Okano Hideyuki (Department of Physiology, Keio University School of Medicine, Tokyo, Japan) ,  Okano Hideyuki (Laboratory for Marmoset Neural Architecture, RIKEN Center for Brain Science, Wako, Japan)
資料名： Frontiers in Neural Circuits (Web)  (Frontiers in Neural Circuits (Web))
巻： 13  ページ： 29  発行年： 2019年 
JST資料番号： U7037A  ISSN： 1662-5110  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： スイス (CHE)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 相関光と電子顕微鏡(CLEM)技術の最近の改良は,組織と細胞を観察する能力の劇的な改善をもたらした。蛍光標識を用いて,生物学的試料の分子的特徴を同定するための免疫染色または遺伝的修飾戦略により,興味ある分子の局在化を可視化した。組織除去のような新しい技術は,蛍光標識のために利用可能な観察の分野を拡大した。しかし,電子顕微鏡(EM)に利用できる相関観察の面積は制限されている。本研究では,マウスおよびマーモセット脳の大規模EM切片における特異的分子局在化を示すための大面積CLEMイメージング手順を開発した。標的分子を抗体で標識し,蛍光と金粒子を用いてクライオスタット切片で連続的に可視化した。蛍光画像は抗体染色直後に光学顕微鏡で得た。免疫染色切片をEMに固定し,銀増強切片を段階的エタノールシリーズで脱水し,樹脂に埋め込んだ。EMの極薄切片を完全重合樹脂ブロックから調製し,シリコンウエハ上に収集し,マルチビーム走査電子顕微鏡(SEM)により観察した。マルチビームSEMは,高分解能で迅速な大面積観察を可能にし,CLEMアプローチを用いて詳細な構造の解析の道を開いた。ここでは,げっ歯類と霊長類の種々の組織における大面積CLEMの詳細な方法について述べる。Copyright 2019 The Author(s) All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： マウス ,  光学顕微鏡 ,  *蛍光 ,  可視化 ,  染色 ,  *画像処理 ,  クライオスタット ,  蛍光標識 ,  走査電子顕微鏡 ,  抗体 ,  免疫染色 ,  重合 ,  電子顕微鏡観察 ,  *大面積 ,  マーモセット属 ,  ネズミ亜目 ,  サル
準シソーラス用語： マーモセット ,  局在化 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： 相関イメージング ,  免疫EM ,  CLEM ,  コネクトミクス ,  マルチビームSEM

分類 (1件)： 中枢神経系  (EJ12030F)

引用文献 (27件)：

• Begemann I., Galic M. (2016). Correlative light electron microscopy: connecting synaptic structure and function. Front. Synaptic Neurosci. 8:28. doi: 10.3389/fnsyn.2016.00028
• Bushong E. A., Johnson D. D. Jr., Kim K. Y., Terada M., Hatori M., Peltier S. T., et al (2015). X-ray microscopy as an approach to increasing accuracy and efficiency of serial block-face imaging for correlated light and electron microscopy of biological specimens. Microsc. Microanal. 21 231-238. doi: 10.1017/S1431927614013579
• Chen J. L., Villa K. L., Cha J. W., So P. T., Kubota Y., Nedivi E. (2012). Clustered dynamics of inhibitory synapses and dendritic spines in the adult neocortex. Neuron 74 361-373. doi: 10.1016/j.neuron.2012.02.030
• Chereau R., Tonnesen J., Nagerl U. V. (2015). STED microscopy for nanoscale imaging in living brain slices. Methods 88 57-66. doi: 10.1016/j.ymeth.2015.06.006
• Cortese K., Diaspro A., Tacchetti C. (2009). Advanced correlative light/electron microscopy: current methods and new developments using Tokuyasu cryosections. J. Histochem. Cytochem. 57 1103-1112. doi: 10.1369/jhc.2009.954214

タイトルに関連する用語 (7件)： マルチ ,  ビーム走査 ,  顕微鏡 ,  大面積 ,  蛍光 ,  相関 ,  イメージング