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J-GLOBAL ID:201902288373855525   整理番号:19A2451130

分枝鎖ポリアミンシンターゼのC末端柔軟領域は基質特異性と触媒作用を促進する【JST・京大機械翻訳】

The C-terminal flexible region of branched-chain polyamine synthase facilitates substrate specificity and catalysis
著者 (13件):
資料名:
巻: 286  号: 19  ページ: 3926-3940  発行年: 2019年 
JST資料番号: B0206B  ISSN: 1742-464X  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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分岐鎖ポリアミン合成酵素(BPSA)は,ドナーからの逐次的なアミノプロピル移動を触媒し,S-アデノシルメチオニン(dcSAM)を受容体,直鎖ポリアミンに脱カルボキシル化し,三級分岐ポリアミン中間体を経て四級分岐ポリアミンの生成をもたらす。ここでは,Thermus thermophilusからのTth-BpsAの触媒特性とX線結晶構造を分析し,これらの2つの酵素間の受容体基質特異性とC末端構造の違いを明らかにしたThermococcus kodakarensis由来のTk-BpsAのそれらと比較した。受容体認識におけるC末端柔軟領域の役割を調べるために,Tth-BpsAにおける領域(QDEEATTY)をTk-BpsA(YDDEESST)と置換し,N4-アミノプロピルスペルミジンに対する触媒効率の厳しい低下を示したが,Tk-BpsA基質特異性を模倣したN4-アミノプロピルスペルミジンに対しては置換しなかった。Tth-BpsA C9Tyr~346及びThr~354は第三分岐鎖ポリアミン基質間の識別に寄与し,BPSAのC末端領域が受容体基質を認識することを示唆した。dcSAMとのTk-BpsA反応混合物に関する液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析は,C末端柔軟領域における5つのアスパラギン酸/グルタミン酸残基(Glu~339,Asp~342,Asp~343,Glu~344,Glu~345)の2つに結合した2つのアミノプロピル基を明らかにした。これら5つのアミノ酸残基をアスパラギン/グルタミンに変異させると活性がわずかに低下した。四重変異体D342N/D343N/E344Q/E345Qは触媒効率の厳しい低下を示し,これらのアスパラギン酸/グルタミン酸残基がアミノプロピル鎖を受け取ることを示唆した。加えて,N4-ビス(アミノプロピル)スペルミジンに結合したTk-BpsA三成分複合体のX線結晶構造は,Asp~126とGlu~259がN4-アミノプロピルスペルミジンのアミノプロピル部分と相互作用することを明らかにした。Copyright 2019 Wiley Publishing Japan K.K. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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酵素一般 
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